[发明专利]一种区别鸭和鹅三种常见致病菌的引物及方法

摘要

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种用于区别鸭和鹅三种常见致病菌的引物及方法根据鸭疫里默氏菌外膜蛋白A基因、禽源多杀性巴氏杆菌KMT1基因、大肠杆菌glyceraldehyde‑3‑phosphate dehydrogenase A基因的保守序列设计三对特异性引物，分别标记于猪线粒体基因片段的两端形成三种不同的捕获探针，将捕获探针与待检测菌的基因组杂交、补平缺口、环化后，采用1对引物反向扩增捕获探针，鸭疫里默氏菌、禽源多杀性巴氏杆菌和大肠杆菌的扩增大小分别为504 bp、422 bp和328 bp。目前尚未见仅用一对引物就能区别鸭疫里默氏菌、禽源多杀性巴氏杆菌和大肠杆菌的PCR方法。

主权项

1.一种区别鸭和鹅三种常见致病菌的引物，其特征在于：所述的引物包括如下：鸭疫里默氏菌捕获探针的引物：RTZF：ATGGACTTAAGGTTCCAACGCATTAACTGCTAGTCCCCAT，RTZR：CATATCAGCACAGAGTTTATCTGCCGGATCATGAGTTCC；禽源多杀性巴氏杆菌捕获探针的引物：FTZF：AGATGATTCGATGGGCGAAGCATTAACTGCTAGTCCCCAT，FTZR：GTATTTCGAGTGTACCGAGTGCCGGATCATGAGTTCC；大肠杆菌捕获探针的引物：ETZF：GTGAGTGCCGGCAAAGCTGGCATTAACTGCTAGTCCCCAT，ETZR：TTACGCTGGCTATGCCGGTTGCCGGATCATGAGTTCC；能同时检测鸭和鹅三种致病菌的检测引物：TZTF：CGTCAAAGGCCCTAACACAGT，TZTR：GGTGATACGCATGTTGACTGG；制备捕获探针时采用的扩增模板为猪源模板。