[发明专利]一种猕猴桃花粉中Psa的检测方法在审
申请号: | 201610464826.2 | 申请日: | 2016-06-22 |
公开(公告)号: | CN105936936A | 公开(公告)日: | 2016-09-14 |
发明(设计)人: | 高贵田;曹凡;杜莹琳;朱丹 | 申请(专利权)人: | 陕西师范大学 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12Q1/04;C12R1/38 |
代理公司: | 西安通大专利代理有限责任公司 61200 | 代理人: | 陆万寿 |
地址: | 710062 *** | 国省代码: | 陕西;61 |
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摘要: | 本发明提供一种猕猴桃花粉中Psa的检测方法,提取花粉混合菌悬液DNA,用根据猴桃Psa的hrpW基因设计两对引特异性引物,进行巢式PCR,从花粉样品中扩增获得大小为590bp左右的外引物扩增和240bp左右的内引物扩增条带,经测序验证为Psa,本发明检测灵敏度为103cfu/mL,本发明建立了特异性更强、稳定性更高、灵敏度较高的Psa快速检测方法,不仅能够区分Pseudomonas syringae pv.Theae、Pseudomonas avellanae等与Psa亲缘关系较近的病原菌,也能区分致病能力弱的Psa,减少了假阳性的出现。 | ||
搜索关键词: | 一种 猕猴桃 花粉 psa 检测 方法 | ||
【主权项】:
一种猕猴桃花粉中Psa的检测方法,其特征在于包括以下处理步骤:a)根据猕猴桃优势Psa靶基因设计巢氏PCR引物;b)进行猕猴桃花粉Psa的培养富集;c)提取花粉菌悬液中Psa的DNA;d)进行巢氏PCR扩增;e)对PCR产物进行电泳检测。
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