[发明专利]CYP2C19、CYP2C9和VKORC1基因分型复合扩增体系及检测试剂盒

摘要

本发明公开一种CYP2C19、CYP2C9和VKORC1基因分型复合扩增体系及检测试剂盒。该扩增体系包括了6个SNP位点的各两个正向引物和一个反向荧光引物，能同时扩增6个SNP位点。本发明体系的特点是通过多重PCR，实现一管式扩增CYP2C19基因上的3个SNP位点、CYP2C9基因上的2个SNP位点、VKORC1基因上的1个SNP位点。特别的是，本扩增体系可以实现血液和血卡样本的直接扩增，免除了提取DNA的步骤；本扩增体系可整合UDG‑dUTP防污染措施，可以有效防止产物污染。本发明检测体系检测位点全面、操作简便、特异性高、灵敏度高、可靠性强、成本低，具备大批量检测的能力。

主权项

CYP2C19、CYP2C9和VKORC1基因分型复合扩增体系，所述扩增体系能同时扩增6个SNP位点，该体系中包括如下引物序列：本专利中6个SNP位点的引物碱基序列如下：CYP2C19*2基因681G>A位点的引物碱基序列如下所示：正向野生型引物：5’‑TTTCCCACTATCATTGATTATTTCCCG‑3’，正向突变型引物：5’‑TTTCCCACTATCATTGATTATTTCCCA‑3’，反向共用引物：5’‑AACTAGTCAATGAATCACAGATACGC‑3’；CYP2C19*3基因636G>A位点的引物碱基序列如下所示：正向野生型引物：5’‑ATCAGGATTGTAAGCACCCCCTGG‑3’，正向突变型引物：5’‑ATCAGGATTGTAAGCACCCCCTGA‑3’，反向共用引物：5’‑GATATTCACCCCATGGCTGTCTA‑3’；CYP2C19*17基因‑806C>T位点的引物碱基序列如下所示：正向野生型引物：5’‑GCATTATCTCTTACATCAGAGATG‑3’，正向突变型引物：5’‑GCATTATCTCTTACATCAGAGATA‑3’，反向共用引物：5’‑ATCTCTCGGGCTGTTTTCCTTAGATAA‑3’；CYP2C9*2基因430C>T位点的引物碱基序列如下所示：正向野生型引物：5’‑GGGCTTCCTCTTGAACACG‑3’，正向突变型引物：5’‑GGGCTTCCTCTTGAACACA‑3’，反向共用引物：5’‑GGGAGGATGGAAAACAGAGACTTAC‑3’；CYP2C9*3基因1075A>C位点的引物碱基序列如下所示：正向野生型引物：5’‑GCTGGTGGGGAGAAGGTCAAT‑3’，正向突变型引物：5’‑GCTGGTGGGGAGAAGGTCAAG‑3’，反向共用引物：5’‑AACCATCCTCTCTTTAAGTTTGC‑3’；VKORC1基因‑1639G>A位点的引物碱基序列如下所示：正向野生型引物：5’‑GCGTGAGCCACCGCACCC‑3’，正向突变型引物：5’‑GCGTGAGCCACCGCACCT‑3’，反向共用引物：5’‑AGCAGGAGAGGGAAATATC‑3’。