[发明专利]H9亚型AIV、H6亚型AIV和AIV的三重RT‑PCR试剂盒及其应用

摘要

本发明公开了用于鉴定或辅助鉴定H9亚型禽流感病毒和/或H6亚型禽流感病毒和/或禽流感病毒的引物对组。利用本发明所提供的引物对组建立的三重RT‑PCR，可准确鉴定H9亚型禽流感病毒和/或H6亚型禽流感病毒和/或禽流感病毒，且特异性好，灵敏度高，对H9亚型禽流感病毒、H6亚型禽流感病毒和禽流感病毒的最小检出限均达到5×10⁴拷贝。因此，本发明所提供的引物对组可同时检测H9亚型禽流感病毒、H6亚型禽流感病毒和禽流感病毒，具有重要的应用价值。

主权项

用于鉴定或辅助鉴定H9亚型禽流感病毒和/或H6亚型禽流感病毒和/或禽流感病毒的引物对组，由特异引物对甲、特异引物对乙和特异引物对丙组成；所述特异引物对甲，由用于扩增特异DNA片段甲的两条引物组成；所述特异DNA片段甲中具有H9亚型禽流感病毒基因组中引物H9‑F和引物H9‑R组成的引物对的靶序列；所述引物H9‑F为如下a1)或a2)：a1)序列表的序列1所示的单链DNA分子；a2)将序列1经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列1具有相同功能的单链DNA分子；所述引物H9‑R为如下a3)或a4)：a3)序列表的序列2所示的单链DNA分子；a4)将序列2经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列2具有相同功能的单链DNA分子；所述特异引物对乙，由用于扩增特异DNA片段乙的两条引物组成；所述特异DNA片段乙中具有H6亚型禽流感病毒基因组中引物H6‑F和引物H6‑R组成的引物对的靶序列；所述引物H6‑F为如下b1)或b2)：b1)序列表的序列3所示的单链DNA分子；b2)将序列3经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列3具有相同功能的单链DNA分子；所述引物H9‑R为如下b3)或b4)：b3)序列表的序列4所示的单链DNA分子；b4)将序列4经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列4具有相同功能的单链DNA分子；所述特异引物对丙，由用于扩增特异DNA片段丙的两条引物组成；所述特异DNA片段丙中具有禽流感病毒基因组中引物M‑F和引物M‑R组成的引物对的靶序列；所述引物M‑F为如下B1)或B2)：B1)序列表的序列5所示的单链DNA分子；B2)将序列5经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列5具有相同功能的单链DNA分子；所述引物M‑R为如下B3)或B4)：B3)序列表的序列6所示的单链DNA分子；B4)将序列6经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列6具有相同功能的单链DNA分子。