[发明专利]快速鉴定谷子抗烟嘧磺隆基因纯合、杂合、不抗型的方法在审
申请号: | 201610436007.7 | 申请日: | 2016-06-17 |
公开(公告)号: | CN105861734A | 公开(公告)日: | 2016-08-17 |
发明(设计)人: | 王根平;张婷;程汝宏;师志刚 | 申请(专利权)人: | 河北省农林科学院谷子研究所 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
代理公司: | 石家庄元汇专利代理事务所(特殊普通合伙) 13115 | 代理人: | 周大伟 |
地址: | 050035 *** | 国省代码: | 河北;13 |
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摘要: | 快速鉴定谷子抗烟嘧磺隆基因纯合、杂合、不抗型的方法,属于基因工程的技术领域,通过检测待测谷子中ALS基因第1877位脱氧核糖核苷酸来进行鉴定,采用能够扩增含有ALS基因第1877位碱基的引物对扩增待测谷子材料的基因组DNA,得到PCR扩增产物,用限制性内切酶酶切所述PCR扩增产物,得到大小不等的酶切产物片段,通过琼脂糖凝胶电泳查看酶切片段,鉴别纯合、杂合或敏感基因型,若酶切后为单条带,则待测谷子材料为不抗烟嘧磺隆谷子材料;若酶切后为两条带,则待测谷子材料为纯合抗烟嘧磺隆谷子材料;酶切后为三条带,则待测谷子材料为杂合抗烟嘧磺隆谷子材料。本方法简单,易操作,鉴定准确度高,成本低。 | ||
搜索关键词: | 快速 鉴定 谷子 抗烟嘧磺隆 基因 不抗型 方法 | ||
【主权项】:
快速鉴定谷子抗烟嘧磺隆基因纯合、杂合、不抗型的方法,其特征在于,通过检测待测谷子材料中ALS基因第1877位的碱基进行鉴定,包括以下步骤:A、基因组PCR扩增:采用扩增引物以待测谷子材料的基因组DNA为模板,进行PCR扩增,得到PCR扩增产物;B、酶切处理:用限制性内切酶酶切得到的PCR扩增产物,得到酶切产物片段;C、抗烟嘧磺隆基因的鉴定:通过琼脂糖凝胶电泳查看酶切产物片段,若酶切后为单条带,则待测谷子材料为不抗烟嘧磺隆谷子材料;若酶切后为两条带,则待测谷子材料为纯合抗烟嘧磺隆谷子材料;酶切后为三条带,则待测谷子材料为杂合抗烟嘧磺隆谷子材料。
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