[发明专利]一种体外构建骺板软骨的方法有效
申请号: | 201610403975.8 | 申请日: | 2016-06-08 |
公开(公告)号: | CN106075580B | 公开(公告)日: | 2019-05-03 |
发明(设计)人: | 李思远;曹峻岭;罗明秀;陆敏灵;王加丽;李锦;陈静宏;付强 | 申请(专利权)人: | 西安交通大学 |
主分类号: | C12N5/077 | 分类号: | C12N5/077;A61L27/36;A61L27/50;A61L27/22 |
代理公司: | 北京超凡志成知识产权代理事务所(普通合伙) 11371 | 代理人: | 李丙林 |
地址: | 710000 *** | 国省代码: | 陕西;61 |
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摘要: | 本发明涉及组织工程技术领域,具体而言,涉及一种体外构建骺板软骨的方法,包括:1)、培养人软骨细胞系细胞或人骨髓干细胞至形成细胞单层后,胰酶消化、清洗、重悬得到细胞悬液,计数备用;2)、将预先处理好的骨基质明胶材料切割为小于培养孔直径的圆柱体,并于所述圆柱体上钻出贯穿圆柱两个底面的孔道,灭菌处理;将切割后的骨基质明胶材料悬空固定于所述培养孔当中;3)、将步骤1)中得到的细胞悬液由孔道植入骨基质明胶材料下方,并使液面浸润骨基质明胶材料,培养得到骺板软骨。该方法建立了C28/I2细胞的培养体系与用其体外构建骺板软骨的方法,解决了种子细胞来源困难的问题;细胞性状稳定,培养成本低。 | ||
搜索关键词: | 一种 体外 构建 软骨 方法 | ||
【主权项】:
1.一种体外构建骺板软骨的方法,其特征在于,包括:1)、培养人软骨细胞系细胞或人骨髓干细胞至形成细胞单层后,胰酶消化、清洗、重悬得到细胞悬液,计数备用;2)、将预先处理好的骨基质明胶材料切割为小于培养孔直径的圆柱体,并于所述圆柱体上钻出贯穿圆柱两个底面的孔道,灭菌处理;将切割后的骨基质明胶材料悬空固定于所述培养孔当中;3)、用无菌琼脂糖凝胶将所述骨基质明胶材料与所述培养孔边缘的缝隙封闭,将步骤1)中得到的细胞悬液由孔道植入骨基质明胶材料下方,并使细胞悬液液面浸润75~85%的骨基质明胶材料支架,培养得到骺板软骨;其中,步骤1)和步骤2)没有先后顺序。
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