[发明专利]一种新型磷脂酶D及其制备磷脂酸、磷脂酰丝氨酸的方法有效
| 申请号： | 201610402557.7 | 申请日： | 2016-06-02 |
| 公开（公告）号： | CN106085984B | 公开（公告）日： | 2019-07-19 |
| 发明（设计）人： | 刘逸寒;路福平;刘浩 | 申请（专利权）人： | 天津科技大学 |
| 主分类号： | C12N9/16 | 分类号： | C12N9/16;C12N15/55;C12P13/06;C12P7/64 |
| 代理公司： | 北京瑞盛铭杰知识产权代理事务所(普通合伙) 11617 | 代理人： | 栗华楠 |
| 地址： | 300222 天*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | 本发明属于酶的基因工程技术领域，具体涉及一种磷脂酶D突变体及其制备与应用。其技术方案是利用重组DNA技术对野生型磷脂酶D基因进行定点突变，得到活力较高的磷脂酶D基因，然后将高活力磷脂酶D基因在枯草芽孢杆菌表达系统、毕赤酵母表达系统(包括毕赤酵母游离表达系统和毕赤酵母细胞表面展示系统)中表达，得到产高活力磷脂酶D的重组菌株，表达后，检测高活力磷脂酶D的比酶活较野生型磷脂酶D提高38‑140％，高活力磷脂酶D在枯草芽孢杆菌表达系统、毕赤酵母表达系统、毕赤酵母表面展示系统内发酵酶活最高值分别为36.8U/ml、48.1U/ml、140.2U/(g·细胞干重)。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 新型 磷脂酶 及其 制备 磷脂酸 磷脂 丝氨酸 方法 | ||
【主权项】：
1.一种磷脂酶D突变体，其特征在于，基于SEQ ID No.2所示的磷脂酶D氨基酸序列，其中的第139、209、256、388、519位氨基酸被置换为以下氨基酸：第139位：Asp139Ile；第209位：Asn209Ile；第256位：Asp256Thr；第388位：Gln388Cys；第519位：Asp519Val。
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