[发明专利]一种耐高温中性植酸酶的制备方法和耐高温中性植酸酶及其应用有效
申请号: | 201610355244.0 | 申请日: | 2016-05-26 |
公开(公告)号: | CN105802936B | 公开(公告)日: | 2019-10-29 |
发明(设计)人: | 莫章桦;韦晓菊;张辉武 | 申请(专利权)人: | 湖南南北旺生物技术有限公司 |
主分类号: | C12N9/16 | 分类号: | C12N9/16;C12N15/55;C12N15/81;A23K20/189;A23K50/80 |
代理公司: | 长沙朕扬知识产权代理事务所(普通合伙) 43213 | 代理人: | 魏龙霞 |
地址: | 410217 湖南省*** | 国省代码: | 湖南;43 |
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摘要: | 本发明公开了一种耐高温中性植酸酶的制备方法,包括以下步骤:将来源于枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)的耐高温中性植酸酶基因克隆至毕赤酵母(Pichia pastoris)中;然后毕赤酵母活化,得到毕赤酵母单菌落;再将活化的毕赤酵母单菌落接入摇瓶中进行培养;接着将摇瓶培养的菌液移至种子罐中进行培养;再将种子罐培养的菌液移至发酵罐中进行发酵培养;最后将得到的发酵液离心过滤,加入稳定剂依次进行吸附、干燥,即得到所述的中性植酸酶。本发明制备的耐高温中性植酸酶能耐高温,并且可在pH为中性的肠道中起作用,提高了植酸酶在动物的胃肠道的效用,拓宽了植酸酶的应用范围。 | ||
搜索关键词: | 一种 耐高温 中性 植酸酶 制备 方法 及其 应用 | ||
【主权项】:
1.一种应用于水产动物饲料中的耐高温中性植酸酶的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)将来源于枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)的耐高温中性植酸酶基因克隆至毕赤酵母(Pichia pastoris)中;(2)将步骤(1)后的毕赤酵母接种于培养基上,倒置于恒温培养箱中培养,得到活化的毕赤酵母单菌落;(3)将活化的毕赤酵母单菌落接入摇瓶中进行培养;(4)将摇瓶培养的菌液移至种子罐中进行培养;(5)将种子罐培养的菌液移至发酵罐中进行发酵培养;(6)将步骤(5)得到的发酵液离心过滤得到离心酶液,再在离心酶液中加入稳定剂依次进行吸附、干燥,即得到所述的中性植酸酶;所述稳定剂由羧甲基纤维素钠和海藻糖组成,其中所述羧甲基纤维素钠的质量与离心酶液的体积比值为0.3%,所述海藻糖的质量与离心酶液的体积比值为0.1%,比值单位为Kg/L;前述干燥温度为50℃。
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