[发明专利]一种高效表达碱性果胶酶的菌株及其构建与应用有效
| 申请号： | 201610346038.3 | 申请日： | 2016-05-23 |
| 公开（公告）号： | CN105950491B | 公开（公告）日： | 2019-08-06 |
| 发明（设计）人： | 刘松;陈双全;陈坚;堵国成 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N1/19 | 分类号： | C12N1/19;C12N9/88;C12R1/84 |
| 代理公司： | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人： | 耿晓岳 |
| 地址： | 214122 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种高效表达碱性果胶酶的菌株及其构建与应用，属于基因工程技术领域。本发明采用基因重组技术将毕赤酵母的ERO1及UBC1基因组合克隆连接到毕赤酵母表达载体pPGAZA上，并转化至Pichiapastoris GS115‑pPIC9K‑PGL菌株中，得到一株较原有菌株高效表达碱性果胶酶的菌株GS115/PGL‑ERO1‑UBC1，摇瓶发酵时相比于使用该方法前的菌株Pichiapastoris GS115‑pPIC9K‑PGL酶活提高49.4％，有明显提高，在3L发酵罐发酵培养时重组菌株Pichiapastoris GS115/PGL‑ERO1‑UBC1最大酶活达到1362.31U/ml，实现碱性果胶酶高效表达，为碱性果胶酶的大规模生产奠定了良好的基础。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 高效 表达 碱性 果胶酶 菌株 及其 构建 应用 | ||
【主权项】：
1.一种高效表达碱性果胶酶的重组菌株，其特征在于，是将毕赤酵母ERO1及UBC1基因组合连接到毕赤酵母表达载体pGAPZA，并转化至重组表达碱性果胶酶的毕赤酵母中；所述重组表达碱性果胶酶的毕赤酵母，是以Pichia pastoris GS115为宿主，以pPIC9K为表达载体，表达基因序列如SEQ ID NO.1所示的碱性果胶酶；所述ERO1基因的序列是NCBI中GenBank登录号XM_002489600.1记载的序列，所述UBC1基因的序列是NCBI中GenBank登录号XM_002493814.1记载的序列。
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