[发明专利]一种白酒中吡嗪类化合物的高效液相色谱检测方法

摘要

一种白酒中吡嗪类化合物的高效液相色谱检测方法，采用高效液相色谱‑荧光检测器(HPLC‑FLD)法对白酒中的吡嗪类化合物进行定性和定量分析，能够同时测定白酒中的2‑甲基吡嗪、2,3‑二甲基吡嗪、2,5‑二甲基吡嗪、2,6‑二甲基吡嗪、2,3,5‑三甲基吡嗪、2‑乙基‑6‑甲基吡嗪、2,3,5,6‑四甲基吡嗪、2,3‑二甲基‑5‑乙基吡嗪8种吡嗪类化合物。该方法不需要经过化学衍生，也不需手性柱或添加手性试剂就可分离吡嗪3种同分异构体，方法灵敏度高，准确度和重复性好，操作简单，成本低廉。

主权项

一种白酒中吡嗪类化合物的高效液相色谱检测方法，其特征在于：包括下述步骤：色谱条件：色谱柱：苯基柱Gemini 5μ C6－Phenyl 110A 250mm×4.6mm；流动相由流动相A和流动相B组成，流动相A：pH=2.1的含磷酸水溶液；流动相B：乙腈；梯度洗脱流动相设置：按体积计算， 0min：含流动相A 95%，流动相B 5%；6min：流动相A 95%，流动相 B 5%；6.1min：流动相A 1%，流动相 B 99%；12min：流动相A 1%，流动相B 99%；12.1min：流动相A 83%，流动B 17%；16min：流动相A 83%，流动B 17%；16.1min：流动相A 95%，流动B 5%；25min：流动相A 95%，流动B 5%；流速：1.0mL/min；柱温：30℃；进样量：10μL；荧光检测器条件：Ex=280nm，Em=348nm；对照溶液的配制：分别精确称取2‑甲基吡嗪、2,5‑二甲基吡嗪、2,6‑二甲基吡嗪、2,3‑二甲基吡嗪、2‑乙基‑6‑甲基吡嗪、2,3,5‑三甲基吡嗪、2,3,5,6‑四甲基吡嗪、2,3‑二甲基‑5‑乙基吡嗪对照品各100mg，用乙醇溶解定容，得10mg/mL标准储备液，储存于4℃冰箱中，用纯水稀释为质量浓度从低到高依次为0.1µg/mL、0.2µg/mL、0.5µg/mL、1.0µg/mL、2.0µg/mL、5.0µg/mL的吡嗪类混合对照品溶液，测定峰面积，以质量浓度为横坐标、峰面积为纵坐标，绘制标准溶液的工作曲线；供试品溶液的制备：取酒样10mL于具塞50mL离心管中，用12mol/LNaOH调pH为12，再用1 mol/L NaOH调pH为14，加NaCl将其饱和，15mL乙醚振荡萃取15min，重复提取2次，收集乙醚层，70℃水浴挥至约0.5ml，水定容1mL，过0.45μm滤膜→HPLC‑FLD进样分析；用外标法定量计算2‑甲基吡嗪、2,3‑二甲基吡嗪、2,5‑二甲基吡嗪、2,6‑二甲基吡嗪、2,3,5‑三甲基吡嗪、2‑乙基‑6‑甲基吡嗪、2,3,5,6‑四甲基吡嗪、2,3‑二甲基‑5‑乙基吡嗪8种吡嗪化合物的浓度。