[发明专利]尿液中代谢物的检测方法和试剂盒有效
申请号: | 201610286816.4 | 申请日: | 2016-04-29 |
公开(公告)号: | CN107340337B | 公开(公告)日: | 2020-07-14 |
发明(设计)人: | 张必良;胡俊杰;吕小侠;叶奕栋 | 申请(专利权)人: | 广州市锐博生物科技有限公司 |
主分类号: | G01N30/02 | 分类号: | G01N30/02;G01N30/06 |
代理公司: | 广州华进联合专利商标代理有限公司 44224 | 代理人: | 万志香 |
地址: | 510663 广东省广州市广*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明涉及一种尿液中代谢物的检测方法,包括以下步骤:(1)去除尿液样本杂质:除尿素、除硫和磷、沉淀蛋白,得尿液C;(2)干燥:干燥尿液C,得尿液残留物D;(3)肟化:将尿液残留物D用肟化试剂对酸类或醇类代谢物中的β‑羰基进行肟化,得尿液E;(4)衍生化:将尿液E用衍生化试剂进行衍生化,得供试尿液样品F;所述衍生化试剂为硅烷化试剂、催化剂和催化剂稳定剂组成的混合试剂;所述催化剂稳定剂选自二硫赤藓糖醇、二硫苏糖醇、1‑丙硫醇、乙硫醇、2‑巯基乙醇;(5)检测:用气相色谱‑质谱联用的方法对供试尿液样品F进行检测。该方法具有样本用量少、前处理简单、耗时短、检测化合物种类多、结果分析快速准确等优点。 | ||
搜索关键词: | 尿液 代谢物 检测 方法 试剂盒 | ||
【主权项】:
一种尿液中代谢物的检测方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)去除样本杂质:(1.1)除尿素:取尿液样本,加入尿素酶水溶液,孵育,去除尿液样本中的尿素,得尿液A;(1.2)除硫和磷:在尿液A中加入活性吸附剂,超声,去除尿液A中的硫和磷,得尿液B;(1.3)沉淀蛋白:在尿液B中加入蛋白沉淀试剂,混匀后离心,使尿液B中的蛋白沉淀,取上清液,得尿液C;(2)干燥:干燥尿液C,得尿液残留物D;(3)肟化:在尿液残留物D中加入肟化试剂对酸类或醇类代谢物中的β‑羰基进行肟化,得尿液E;(4)衍生化:在尿液E中加入衍生化试剂进行衍生化反应,得供试尿液样品F;所述衍生化试剂为硅烷化试剂、催化剂和催化剂稳定剂组成的混合试剂;所述催化剂稳定剂选自二硫赤藓糖醇、二硫苏糖醇、1‑丙硫醇、乙硫醇、2‑巯基乙醇;(5)检测:取供试尿液样品F用气相色谱‑质谱联用的方法进行检测。
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