[发明专利]血清中尿素氮肌酐双项同时测定方法

摘要

本发明公开了一种血清中尿素氮肌酐双项同时测定方法，属于利用可见光，通过测试反应结果颜色的变化来测试材料的方法，其技术方案是：试剂II中仅有肌酐酰氨基水解酶、肌酸脒基水解酶有效组分；试剂I中含有尿素酶、谷氨酸脱氢酶、α‑酮戊二酸、NADH有效成分；测定方法为：血清先与试剂Ⅰ于37℃温浴3～5分钟，血清中尿素与试剂Ⅰ反应生成NAD⁺，加入试剂Ⅱ于37℃温浴4～7分钟，肌酐经肌酐酰氨基水解酶水解后生成肌酸，肌酸经肌酸脒基水解酶作用下生成尿素，尿素在尿素酶作用下与试剂I生成NAD⁺，在340nm波长处反应速度与同样处理过的标准品比较，测定中第一步反应NADH变化即为血清中尿素氮的含量，第二步反应NADH变化即为血清中肌酐的含量。

主权项

一种血清中尿素氮肌酐双项同时测定方法，其特征在于试剂Ⅱ内仅含有肌酐酰氨基水解酶、肌酸脒基水解酶有效成分；试剂I中含有尿素酶、谷氨酸脱氢酶、α‑酮戊二酸、NADH等有效成分；测定方法为：血清先与试剂Ⅰ于37℃温浴3～5分钟，血清中尿素与试剂Ⅰ反应生成NAD⁺，加入试剂Ⅱ于37℃温浴4～7分钟，肌酐经肌酐酰氨基水解酶后生成肌酸，肌酸经肌酸脒基水解酶作用下生成尿素，尿素在尿素酶作用下生成NAD⁺，在340nm波长处反应速度与同样处理过的标准品比较，第一步反应NADH变化即为血清中尿素氮的含量，第二步反应NADH变化即为血清中肌酐的含量。尿素氮浓度＝F×ΔOD_BUN/Δt肌酐浓度＝F×ΔOD_Cr/Δt其中ΔOD_BUN/Δt是单位时间内尿素氮产生的速率，ΔOD_Cr/Δt是单位时间内肌酐产生的速率，F是校正因数。