[发明专利]一种角叉菜悬浮培养的方法

摘要

本发明公开了一种角叉菜悬浮培养的方法，包括以下步骤：(1)野外采样；(2)藻体处理；(3)孢子释放；(4)孢子收集；(5)藻苗悬浮培养。本发明解决角叉菜渡夏过程中的保存问题；稳定性高，可控性强；有效解决大面积推广所需种源问题，较营养繁殖，有性生殖可缓解种质退化问题；较传统养殖，悬浮培养采收容易,可节省人力物力。

主权项

一种角叉菜悬浮培养的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)野外采样角叉菜主要栖生于高潮带至低潮带的礁石上，采样时，首先挑选健康颜色鲜艳的藻体，然后将藻体置于光下,通过观察成体藻的形态特征而确定藻体的基本繁殖方式，然后无水低温带回实验室；(2)藻体处理带回实验室的藻体，应尽快处理，在倒置显微镜下，使用无菌刀片取其藻体的成熟部分，然后用无菌海水冲洗数次，无菌棉球擦拭去除表面附生生物，最后将藻体置于无菌培养皿即1％VSE无菌海水中，在10‑15℃,10‑100umol/m²s环境下培养；(3)孢子释放50‑70分钟后，在倒置显微镜下观察藻体孢子放散情况，观察培养液中红色圆形小球来表征藻体孢子的放散；(4)孢子收集孢子放散后立即收集，使用拉丝后的移液器，在倒置显微镜下吸取孢子，并置于无菌的培养板即1％VSE无菌海水中，重复多次上述步骤，直至达到期望的孢子浓度在10‑15℃,10‑200μmol/m²s环境下培养，每周更换一次营养液；(5)藻苗悬浮培养待藻体长到至少1mm，用无菌解剖刀轻轻刮取附着的藻苗，此过程应该快速，避免藻体污染，使用125‑250um/m目数的筛网过滤，将藻苗转至无菌三角瓶中，三角瓶中为1％VSE无菌海水；三角瓶密封通气培养，气流大小保证藻体可缓慢滚动，又不至于将藻体吹至瓶壁上，每周更换一次培养液。