[发明专利]一种家蚕shRNA表达载体构建方法和应用在审
| 申请号： | 201610248847.0 | 申请日： | 2016-04-20 |
| 公开（公告）号： | CN105779483A | 公开（公告）日： | 2016-07-20 |
| 发明（设计）人： | 王强;鞠小丽;陈亮;夏恒传;刘晓勇;陈克平 | 申请（专利权）人： | 江苏大学 |
| 主分类号： | C12N15/66 | 分类号： | C12N15/66 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 212013 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种家蚕shRNA表达载体构建方法和应用，属于昆虫病毒基因工程领域。所述的载体包括该载体启动子酶切后和家蚕RNA干扰启动子替换。所述的克隆方法包括体外合成互补的单长链DNA通过自身退火形成互补的含粘性末端的双链DNA。将酶切后的载体和双链DNA通过粘性末端连接后，通过克隆后测序验证。本发明构建的家蚕shRNA载体只需要通过体外合成单长链DNA就可以高效、快速的干扰家蚕目的基因的表达。同时可以对其它一些昆虫细胞基因进行干扰研究。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 家蚕 shrna 表达 载体 构建 方法 应用 | ||
【主权项】：
一种家蚕shRNA表达载体构建方法，其特征在于，采用家蚕RNA聚合酶III U6‑2启动子，并对该启动子两端分别引用了BspH I和Hind III酶切位点，通过这两个酶切位点置换pIB/V5‑his载体上的OpIE2启动子。
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