[发明专利]一种基于异养微藻油脂积累的方法

摘要

本发明公开了一种基于异养微藻油脂积累的方法，主要包括：首先利用葡萄糖作为有机碳源异养培养微藻至对数生长期后期，经新鲜BG‑11培养基稀释重新悬浮后作为诱导藻液；然后用纯水配制100mM的甜菜碱母液，将甜菜碱母液添加到已经稀释好的诱导藻液中稀释甜菜碱母液，并将藻液置于强光照下培养；最后隔天离心收集藻细胞，并利用有机溶剂浸提藻细胞内油脂。本发明方法操作简单，能够缩短藻细胞生长周期，提高油脂的产率，为微藻产业化过程中存在的藻种扩培时间长、油脂产率低等问题提供了一种有效的技术手段。

主权项

1.一种基于异养微藻油脂积累的方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1、诱导藻液的制备：在25℃时，以10g/L葡萄糖为碳源的BG‑11基础培养基异养培养单针藻，待单针藻生长至对数生长期后期收集藻细胞，用新鲜的BG‑11培养基稀释重悬浮藻细胞至1g/L作为诱导藻液，所述的微藻为单针藻菌株Monoraphidium sp.QLY‑1(NCBI:KM199735)；步骤2、诱导藻细胞积累油脂：用纯水配制100mM的甜菜碱母液，将甜菜碱母液添加到已经稀释好的诱导藻液中使甜菜碱浓度为5‑20mM，并置于光照条件下诱导培养，诱导条件为：温度24‑26℃、光强95‑105umol·m‑2·s‑1、冷光灯持续光照诱导；步骤3、利用有机溶剂提取藻细胞内油脂，具体方法为：首先将培养液经4000r/min离心富集5min，并用蒸馏水反复洗涤2次后冻干制成干藻粉，称重；其次加入所述干藻粉2倍质量的石英砂，且充分研磨；随后加入适量体积比为1:2的氯仿‑甲醇溶液重复抽提至藻体发白，最后离心收集有机相干燥称重，即可。