[发明专利]一种重组流感病毒及其在抑制肿瘤细胞增殖和诱导干扰素的产生中应用

摘要

本发明公开了一种重组流感病毒及其在抑制肿瘤细胞增殖和诱导干扰素的产生中应用。本发明所提供的重组流感病毒是出发B型流感病毒的基因组进行如下改造得到的：增加了含有caspase3‑1的编码基因和caspase3‑2的编码基因的DNA分子；所述caspase3‑1的氨基酸序列为序列表中序列10自N末端起第285至431位所示的亚基；所述caspase3‑2的氨基酸序列为序列表中序列10自N末端起第447至542位所示的亚基。实验证明，本发明所提供的重组流感病毒对A549细胞、Hela细胞和HepG2细胞均具有抑制作用和杀伤作用，重组流感病毒对肿瘤的治疗具有重要价值。

主权项

1.一种重组B型流感病毒，其特征在于：所述重组B型流感病毒是出发B型流感病毒的基因组进行改造得到的；所述改造的实现方式为：用特异DNA分子取代所述出发B型流感病毒的基因组中的非结构蛋白的编码基因；所述特异DNA分子中自上游至下游依次含有如下元件： NS1区段、caspase3‑1的编码基因、caspase3‑2的编码基因、猪捷申病毒核糖体stop/start 2A的结合位点的编码基因和NEP区段；所述NS1区段编码氨基酸序列为序列表中序列10自N末端起第1至281位所示的蛋白质；所述NEP区段编码氨基酸序列为序列表中序列11自N末端起第23至144位所示的蛋白质；所述出发B型流感病毒的基因组中的非结构蛋白的编码基因为序列表的序列9所示的DNA分子；所述重组B型流感病毒制备方法包括如下步骤：将质粒pHH21‑M、质粒pHH21‑PA、质粒pHH21‑PB1、质粒pHH21‑PB2、质粒pHH21‑HA、质粒pHH21‑NP、质粒pHH21‑NA和质粒pHW2000‑NS‑caspase3共转染离体的哺乳动物细胞后培养哺乳动物细胞，得到重组病毒；所述质粒pHH21‑M含有B型流感病毒的基因组中基质蛋白的编码基因；所述质粒pHH21‑PA含有B型流感病毒的基因组中酸性聚合酶的编码基因；所述质粒pHH21‑PB1含有B型流感病毒的基因组中的聚合酶Ⅰ的编码基因；所述质粒pHH21‑PB2含有B型流感病毒的基因组中的聚合酶Ⅱ的编码基因；所述质粒pHH21‑HA含有B型流感病毒的基因组中的血凝素的编码基因；所述质粒pHH21‑NP含有B型流感病毒的基因组中的核蛋白的编码基因；所述质粒pHH21‑NA含有B型流感病毒的基因组中的神经氨酸酶的编码基因；所述质粒pHW2000‑NS‑caspase3含有所述特异DNA分子；所述caspase3‑1的氨基酸序列为序列表中序列10自N末端起第285至431位所示的亚基；所述caspase3‑2的氨基酸序列为序列表中序列10自N末端起第447至542位所示的亚基。