[发明专利]一种高效表达海肾荧光素酶基因的产品及其应用

摘要

本发明公开了一种高效表达海肾荧光素酶基因的能够用于高通量筛选抗冠状病毒药物的产品及其应用。本发明首先通过重叠PCR方法将海肾荧光素酶基因以替换或者插入到附属基因(ns2和ns12.9)中的方式克隆到人冠状病毒OC43全长感染性克隆pBAC‑OC43FL中，获得了四种高效表达海肾荧光素酶基因的能够用于高通量筛选抗病毒药物的产品：rOC43‑ns2DelRluc、rOC43‑ns2FusionRluc、rOC43‑ns12.9StopRluc和rOC43‑ns12.9FusionRluc。其中rOC43‑ns2DelRluc能够高效表达海肾荧光素酶基因，插入的报告基因在连续传代过程中较为稳定，并且能够成功应用于抗病毒药物筛选实验，在高通量筛选抗冠状病毒药物和宿主抗病毒基因等方面有广泛的应用前景。

主权项

本发明公开了一株高效表达海肾荧光素酶基因的人冠状病毒OC43重组病毒，其特征在于：海肾荧光素酶基因(含终止密码子)替换人冠状病毒OC43附属基因ns2编码区内第19位碱基到第713位碱基，并保留717‑837位的碱基序列。