[发明专利]一种番茄斑萎病毒接种的方法在审
申请号: | 201610145832.1 | 申请日: | 2016-03-15 |
公开(公告)号: | CN105724078A | 公开(公告)日: | 2016-07-06 |
发明(设计)人: | 赵凯;朱海山;张宏;邓明华;杨正安;莫云容;张培欣;汤晓倩 | 申请(专利权)人: | 云南农业大学 |
主分类号: | A01G7/06 | 分类号: | A01G7/06 |
代理公司: | 昆明今威专利商标代理有限公司 53115 | 代理人: | 杨宏珍 |
地址: | 650201 云南省昆明市*** | 国省代码: | 云南;53 |
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摘要: | 本发明涉及一种番茄斑萎病毒接种的方法,属植物保护领域。该方法包括如下步骤:(1)配置50mM pH7.2磷酸缓冲液并灭菌;(2)播种番茄,长至4片真叶后用于接种;(3)按1:5(质量:体积)比例加入磷酸缓冲液研磨低温保存的感病番茄叶片至匀浆;(4)取匀浆低温高速离心,将上清液加入塑料小喷壶中;(5)番茄幼苗浸入超声波清洗仪中的磷酸缓冲液中振荡10秒钟后,将喷壶中的病毒液体喷洒到处理过的番茄幼苗叶片上;(6)在100%相对湿度,黑暗的人工气候箱中培养12小时后,取出置于常规条件下培养。本发明的有益效果在于:能够提高番茄幼苗病毒接种的速度,并能使全株番茄叶片感病,快速高效的鉴定番茄对病毒的抗性,加快抗病品种的选育。 | ||
搜索关键词: | 一种 番茄 病毒 接种 方法 | ||
【主权项】:
一种番茄斑萎病毒接种的方法,其特征在于该方法的具体步骤如下:第一步:配置50mM pH7.2的磷酸缓冲液,121℃灭菌20分钟,备用;第二步:播种番茄,待幼苗长出4片真叶时进行番茄斑萎病毒接种;第三步:取出保存于‑80℃的感染番茄斑萎病毒的番茄叶片,称重后用剪刀剪碎,放到研钵中,按质量:体积=1:5的比例加入磷酸缓冲液研磨至匀浆状;第四步:将研磨好的匀浆装入离心管,4℃,5000rpm离心10分钟,取上清液装入塑料小喷壶中;第五步:取番茄幼苗,将整株番茄浸入超声波清洗仪中的磷酸缓冲液中,200W振荡10秒钟,取出,将塑料小喷壶中含有番茄斑萎病毒的上清液喷洒到超声波处理过的番茄叶片上;第六步:接种过斑萎病毒的番茄植株置于人工气候箱中,在100%相对湿度,黑暗的条件下培养12小时,之后取出置于常规条件培养。
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