[发明专利]一种牡丹籽降血糖肽及其纯化方法和应用

摘要

本发明公开了一种牡丹籽降血糖肽，其制备方法如下：(1)牡丹籽脱脂粉与水混合均匀，超声搅拌提取蛋白，离心，所得沉淀重复提取两次，合并上层液体并使用1mol/L HCl调节pH至4～4.5，离心，取沉淀进行冷冻干燥，得牡丹籽蛋白；(2)配制1～3％牡丹籽蛋白溶液，使用胰蛋白酶超声辅助酶解，反应结束，沸水浴10～15min进行灭酶，即可得到牡丹籽降血糖肽。本发明进一步提出了上述牡丹籽降血糖肽的纯化方法和应用。本发明利用超声波辅助生物酶法降解牡丹籽蛋白，将其切成多种不同分子量多肽，然后使用超滤、离子交换、葡聚糖凝胶和高效液相色谱进行分离纯化，不仅可以高效的进行酶切反应，获得大量的牡丹籽降血糖肽，并且在纯化过程能够保持多肽活性不丧失，便于生产利用。

主权项

1.一种牡丹籽降血糖肽，其特征在于，其通过如下方法制备得到：（1）将牡丹籽榨油之后得到的牡丹籽脱脂粉与水按照料液比1:8~12混合均匀，调节pH至9~9.5，40~60℃下超声搅拌提取蛋白，然后3500~3800 r/min离心10~15min，取上层液体，所得的沉淀按上述方法重复提取两次，合并所得的上层液体，使用1mol/L HCl调节pH至4~4.5，3500~3800r/min离心10~15min，取沉淀进行冷冻干燥，即得牡丹籽蛋白；（2）配制1~3%牡丹籽蛋白溶液，使用胰蛋白酶酶解，按照加胰蛋白酶5000~125000U/g，pH7.5~8.5，温度35~40℃，超声辅助酶解的时间15~25min，超声波频率22~40kHz，功率50~200W/L，反应结束，沸水浴10~15min进行灭酶，即可得到牡丹籽降血糖肽。