[发明专利]一种重组大肠杆菌及合成3-羟基丙酸中的应用有效
| 申请号： | 201610116652.0 | 申请日： | 2016-03-02 |
| 公开（公告）号： | CN105567622B | 公开（公告）日： | 2019-10-29 |
| 发明（设计）人： | 牛坤;郑裕国;熊涛;秦海彬;黄建峰;柳志强 | 申请（专利权）人： | 浙江工业大学 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12P7/42;C12R1/19 |
| 代理公司： | 杭州天正专利事务所有限公司 33201 | 代理人： | 黄美娟;李世玉 |
| 地址： | 310014 浙*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种重组大肠杆菌及合成3‑羟基丙酸中的应用，所述重组大肠杆菌是将甘油脱水酶基因dhaB123、甘油脱水酶再激活因子基因gdrA、α‑酮戊二酸半醛脱氢酶突变体编码基因TUkgsadh和甘油三磷酸脱氢酶编码基因gpd1导入宿主菌中构建而成；通过利用基因敲除技术降低副产物1,3‑丙二醇产量的同时再生醛脱氢酶的辅因子NAD+，从而提高3‑羟基丙酸的产量，提高15倍。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 重组 大肠杆菌 合成 羟基 丙酸 中的 应用 | ||
【主权项】：
1.一种重组大肠杆菌，其特征在于所述重组大肠杆菌是将甘油脱水酶基因dhaB123、甘油脱水酶再激活因子基因gdrA、α‑酮戊二酸半醛脱氢酶突变体编码基因TUkgsadh和甘油三磷酸脱氢酶编码基因gpd1导入宿主菌中构建而成；所述宿主菌为敲除乙醛还原酶/醇脱氢酶基因yqhD的大肠杆菌，所述α‑酮戊二酸半醛脱氢酶突变体是将α‑酮戊二酸半醛脱氢酶的120位谷氨酸突变为天冬氨酸，219位脯氨酸突变为丙氨酸获得的；所述甘油脱水酶基因dhaB123和甘油脱水酶再激活因子基因gdrA的核苷酸序列为SEQ ID NO.1所示、α‑酮戊二酸半醛脱氢酶突变体编码基因TUkgsadh核苷酸序列为SEQ ID NO.3所示、甘油三磷酸脱氢酶编码基因gpd1核苷酸序列为SEQ ID NO.4所示，α‑酮戊二酸半醛脱氢酶突变体编码基因TUkgsadh核苷酸序列为SEQ ID NO.2所示；所述甘油脱水酶基因dhaB123和甘油脱水酶再激活因子基因gdrA通过重组载体pACYCDuet‑tac‑dhaB123‑gdrA导入宿主菌中；所述α‑酮戊二酸半醛脱氢酶突变体编码基因TUkgsadh通过重组载体pCDFDuet‑tac‑gpd1‑TUkgsadh导入宿主菌中；所述甘油三磷酸脱氢酶编码基因gpd1通过重组载体pCDFDuet‑tac‑gpd1‑TUkgsadh导入宿主菌中。
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