[发明专利]SIRT6的调节物及其筛选分析

摘要

一种鉴定Sirt6、PfSir2a或Sirt7去酰基酶活性调节物的方法，其中在Sirt6、PfSir2a或Sirt7使底物去酰基的条件下，在存在候选化合物的情况下将含有酰基‑赖氨酸部分和指示物部分的脂肪‑酰基化底物与Sirt6、PfSir2a或Sirt7接触，其中所述酰基是疏水性脂肪酰基基团，其含有至少三个通过碳‑碳键连接的碳原子的烃基；将所述去酰基化的底物与裂解试剂接触，所述裂解试剂裂解所述赖氨酸与指示物部分之间的连接以产生可检测的信号；且由此关联定量的Sirt6、PfSir2a或Sirt7去酰基酶的活性。本申请还描述了Sirt6、PfSir2a或Sirt7去酰基酶活性的调节化合物，及其药物组合物，通过给予所述调节化合物的治疗方法，以及实施所述方法的试剂盒。

主权项

一种鉴定Sirt6、PfSir2a或Sirt7去酰基酶活性调节物的方法，所述方法包括：在Sirt6、PfSir2a或Sirt7使底物去酰基的条件下，在存在候选化合物的情况下将酰基化的底物与Sirt6、PfSir2a或Sirt7接触以提供去酰基的底物，其中所述酰基化的底物含有酰基‑赖氨酸部分和指示物部分，所述酰基含有至少三个通过碳‑碳键连接的碳原子的烃基，其中所述烃基任选地包括一个选自O、N和S的杂原子，所述杂原子打断所述烃基的碳‑碳键或者取代所述烃基中的碳原子，但是所述杂原子为OH、SH或NH₂基团形式的不包括在内，并且其中在所述烃基中的一个或多个氢原子任选地被氟原子取代，以及其中所述赖氨酸的侧链ε‑氨基丁基基团可以衍生化；将去酰基的底物与裂解试剂接触，所述裂解试剂裂解所述赖氨酸和指示物部分之间的连接以释放所述指示物部分并产生具有信号强度的可检测信号；以及将所述信号强度与Sirt6、PfSir2a或Sirt7去酰基酶活性相关联；其中通过存在所述候选化合物的条件下的Sirt6、PfSir2a或Sirt7去酰基酶活性相对于不存在所述候选化合物的条件下的Sirt6、PfSir2a或Sirt7去酰基酶活性的变化，将所述候选化合物鉴定为Sirt6、PfSir2a或Sirt7去酰基酶活性的调节物；其中所述酰基化的底物具有下述化学结构：其中R₇是具有至少五个通过碳‑碳键连接的碳原子的烃基，其中所述烃基任选地包括一个选自O、N和S的杂原子，所述杂原子打断所述烃基的碳‑碳键或者取代所述烃基中的碳原子，但是所述杂原子为OH、SH或NH₂基团形式的不包括在内，以及其中在所述烃基中的一个或多个氢原子任选地被氟原子取代；R₈选自S、NR₁₃和O，其中R₁₃是氢原子或烃基R；X₄、X₅和X₆独立地选自‑(CH₂)_n‑、‑NR₁₄‑、‑O‑、‑S‑或键，其中R₁₄是氢原子或烃基R，以及其中n表示1、2或3；R₁₁是氢原子或烃基R；R₉和R₁₀独立地为氢原子或烃基R，其中R₁₀还可以是OH或SH，以及其中R₉和R₁₀中的至少一个是指示物部分；其中所述烃基R独立地为未取代的或者被一个或多个选自N、O、S、P和F的杂原子或含有一个或多个所述杂原子的杂原子基团所取代。