[发明专利]一种紫花杯冠藤组培快繁的方法

摘要

本发明涉及一种紫花杯冠藤组培快繁的方法，属于组织培养领域，包括以下步骤：外植体的选择及处理、外植体的消毒、接种培养、继代增殖培养、生根培养。本发明培养方法速度快，再生频率较高，扩繁系数高达40倍以上，并且变异率较低，周期相对较短，能较好地保持紫花杯冠藤的遗传稳定性。培养的组培苗移栽成活率高，达到85％以上。

主权项

1.一种紫花杯冠藤组培快繁的方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)外植体的选择及处理：选用带有腋芽的野外植株，用干净的剪刀剪下带有2个腋芽的茎段，把茎段用干净的封口袋保存，保存时间不超过两天并且不能沾水；(2)外植体的消毒：把步骤(1)得到的茎段放在烧杯中，先加入2～4滴洗洁精，再加水冲洗2～3次至无泡沫，冲洗时间不能过长以免造成二次污染，然后将其在超净台中先用体积浓度70％的酒精浸0.5～2分钟，无菌水冲洗2～4次，用加两滴吐温的质量浓度为5％的次氯酸钠溶液消毒3～7分钟后用无菌水洗4～6次；再用加两滴吐温的质量浓度0.1％的升汞消毒5～15分钟，后用无菌水洗5～6次；(3)接种培养：将茎段剪成1cm的小段，每段带两个腋芽，将其接种到接种培养基上，所述的接种培养基为MS+6-BA0.05mg/L+IBA0.1mg/L+糖30g/L；(4)继代增殖培养：接种成功后将分化的芽接种到继代增殖培养基上进行继代增殖，每次继代30天，所述的继代增殖培养基为MS+6-BA1mg/L+IBA0.1mg/L+糖30g/L；(5)生根培养：将经过继代培养的分化芽转移到生根培养基上诱导生根，所述的生根培养基为1/2MS+IBA0.1～0.2mg/L+糖20g/L。