[发明专利]一种金线莲组培苗的壮苗增重方法

摘要

本发明公开的金线莲组培苗的壮苗增重方法，包括以下步骤组培苗的准备，综合培养基的配制，组培苗的无菌接种，组培苗的培养；本发明操作简单，经过一次性诱导综合培养基接种组培苗，并根据金线莲野外生长特性，通过培养温度、光照强度、光照周期的控制培养组培苗，培养得到健壮老练的高品质金线莲组培苗。本发明通过一个综合培养基即可完成对组培苗的诱导、壮苗和生根过程，不需要进行反复的转接，可大幅降低人工成本投入。本发明方法配制的综合培养基以天然抑菌添加物为主，无有害化学成分添加，能够有效降低金线莲组培污染率。本发明方法可显著提高金线莲组培苗的粗壮度，经本发明方法培养得到的金线莲组培苗的平均单株鲜重为1.9克左右。

主权项

一种金线莲组培苗的壮苗增重方法，其特征在于包括以下步骤：（1）组培苗的准备：将以野生金线莲为外植体经脱毒后获得的继代次数在3‑6次的无菌母苗作为组培苗；（2）综合培养基的配制：以MS培养基作为基础培养基，以该基础培养基的体积计，向该基础培养基中添加下列添加物：萘乙酸0.6‑1.2 mg/L、活性炭0.5‑0.7 g/L、6‑苄氨基腺嘌呤0.05‑0.3 mg/L、花宝一号0.5‑1.0 g/L、花宝三号0.2‑0.6 g/L、蛋白胨0.3‑0.8 g/L、去皮香蕉30‑50 g/L、去皮马铃薯40‑60 g/L、去皮大蒜10‑20 g/L、蔗糖25‑35 g/L和琼脂6.0‑6.5 g/L，得到综合培养基，并将该综合培养基的pH值调至5.5~6.2，之后将配制的综合培养基分装到带透气孔的650 mL组培瓶中，每个组培瓶的灌液深度为2.5‑3.5 cm，然后将各个组培瓶在高压灭菌锅内于121 ℃灭菌21‑24 min，冷却后备用；（3）组培苗的无菌接种：在无菌条件下将步骤（1）中准备的组培苗去叶，切成每段含有1个茎节的茎段，每个组培瓶内接种18‑22个茎段；（4）组培苗的培养：组培苗无菌接种后，先将各个组培瓶于22‑24 ℃下暗处理5‑7天，然后在温度为23‑24 ℃且每日光照强度800‑1500 Lux、光照时间11‑12 h的培养环境下培养28‑32天，之后在温度为26‑27 ℃且每日光照强度1800‑3000 Lux、光照时间12‑13 h的培养环境下培养58‑62天，最后在温度为20‑24 ℃且每日光照强度3000‑5000 Lux、光照时间10‑11 h的培养环境下培养48‑52天，生根，即得到健壮的金线莲组培苗。