[发明专利]一种多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶的检测方法有效
| 申请号： | 201610040362.2 | 申请日： | 2016-01-18 |
| 公开（公告）号： | CN105606671B | 公开（公告）日： | 2018-06-26 |
| 发明（设计）人： | 许媛媛;苗晋锋;张源淑;邵营格;孙杨杨;卢辰赫 | 申请（专利权）人： | 南京农业大学 |
| 主分类号： | G01N27/26 | 分类号： | G01N27/26;G01N27/48 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 210095 *** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明属于分析化学技术领域，涉及一种多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)的检测方法及其应用。本发明主要是利用经典巯基自组装的方式将能够与PARP特异结合的单链DNA(c‑kit‑1)修饰于金电极表面，经处理使c‑kit‑1形成四聚体构型；与PARP孵育后，加入该酶特定的催化底物尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)，即可促使PARP自催化产生一条带有高负电荷的聚腺苷二磷酸核糖(PAR)；利用PAR的负电荷吸附带正电荷的电信号分子六氨合钌(RuHex)，通过电分析方法对电极表面吸附的RuHex进行定量，通过电化学信号与PARP浓度的关系，绘制标准曲线，通过测量待测样品的电化学信号，通过计算即可实现PARP的灵敏检测。该方法具有好的重复性，高的灵敏度，可应用于PARP及其抑制剂3‑氨基苯甲酰胺(3‑AB)的检测。 | ||
| 搜索关键词： | 腺苷二磷酸 核糖 电化学信号 聚合酶 检测 尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸 氨基苯甲酰胺 分析化学技术 对电极表面 金电极表面 标准曲线 催化底物 待测样品 高负电荷 灵敏检测 特异结合 单链DNA 灵敏度 电分析 负电荷 四聚体 吸附带 抑制剂 正电荷 自催化 自组装 氨合 孵育 构型 吸附 修饰 巯基 应用 测量 绘制 | ||
【主权项】：
1.一种多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)的检测方法，其特征在于利用经典巯基自组装的方式将能够与PARP特异结合的单链DNA即c‑kit‑1修饰于金电极表面，经处理使c‑kit‑1形成四聚体构型；与PARP孵育后，加入该酶特定的催化底物尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)，促使PARP发生自催化产生一条带有高负电荷的聚腺苷二磷酸核糖(PAR)；利用PAR的负电荷吸附带正电荷的电信号分子六氨合钌(RuHex)，利用电分析方法对电极表面吸附的RuHex进行定量，通过制定标准曲线，即可实现PARP及其抑制剂3‑氨基苯甲酰胺(3‑AB)的灵敏检测。
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