[发明专利]HAV病毒样颗粒的制备方法及其应用在审
| 申请号： | 201610024713.0 | 申请日： | 2016-01-14 |
| 公开（公告）号： | CN105505926A | 公开（公告）日： | 2016-04-20 |
| 发明（设计）人： | 张晓文;房保海;孙明君;尹伟力;岳志芹;王群;梁成珠;王宫璞;贾俊涛 | 申请（专利权）人： | 山东出入境检验检疫局检验检疫技术中心 |
| 主分类号： | C12N15/11 | 分类号： | C12N15/11;C12N15/70;C12N7/04;C12Q1/70;C12Q1/68 |
| 代理公司： | 济南泉城专利商标事务所 37218 | 代理人： | 刘帅帅 |
| 地址： | 266002 山*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 本发明公开了含有甲肝病毒HAV5’-UTR基因的病毒样颗粒的制备方法。该病毒样颗粒是由MS2噬菌体编码外壳蛋白包裹HAV5’-UTR RNA的一种RNA-蛋白复合体；将编码组氨酸标签序列插入MS2噬菌体编码外壳蛋白的β发夹环结构序列中，构建含有重组组氨酸标签的MS2噬菌体外壳蛋白和表达成熟酶蛋白基因的pNH-MS2his重组质粒。通过RT-RCR扩增HAV5’-UTR基因，将其克隆于pNH-MS2his中，构建原核重组表达质粒并命名为pNH-MS2his-HAV5’-UTR。将所得pNH-MS2his-HAV5’-UTR质粒转化于表达大肠杆菌BL21中进行诱导表达。采用Ni-NTA的纯化柱纯化病毒样颗粒，所得的病毒样颗粒即为含HAV5’-UTR基因的病毒样颗粒，命名为HAV5’-UTR-VLPs。本发明的HAV5’-UTR-VLPs病毒样颗粒可作为RT-PCR检测的标准品和质控品，无传染性，安全可靠、稳定性好，具有耐核糖核酸酶的特点。 | ||
| 搜索关键词： | hav 病毒 颗粒 制备 方法 及其 应用 | ||
【主权项】：
一组扩增HAV5’‑UTR基因的引物，其特征在于，序列如下：HAV‑UTRf1：ATACCTCACCGCCGTTTGCCTAGGCTA；HAV‑UTRr1：AAGAATGAGGAAAAACCTAAATGCC；5‘端和3’端分别加上Hind III和Not I酶切位点。
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