[发明专利]一种灯笼树组培苗高频再生快速繁殖方法

摘要

本发明涉及一种灯笼树组培苗高频再生快速繁殖方法。本发明其特征在于以半木质化嫩茎的休眠腋芽为基础，主要步骤包括外植体的取材和消毒处理、诱导休眠腋芽萌发、诱导不定芽和侧芽高频发生、壮苗培养、瓶内生根培养和炼苗移栽，最终得到与亲本性状一致、品质优良、抗逆性强的再生植株。本发明能够在较短时间内得到大量规格一致、品质优良的苗木，有力地推动了灯笼树市场化的进程。

主权项

一种灯笼树组培苗高频再生快速繁殖方法，其特征在于包括以下步骤：1)3月份选取灯笼树性状优良单株，将其放到温室内养护，直至5月份，待新芽抽出后，剪取其中半木质化的嫩茎作为外植体材料，将叶片沿叶柄基部切去，嫩茎切成小段，每段有一个休眠腋芽，清洗、消毒处理后备用，将腋芽茎段的芽向上接种到启动培养基上，启动培养基为：wpm+0.001‑0.005mg/L噻苯隆TDZ+0.005‑0.01mg/L萘乙酸NAA+3％蔗糖+0.6％琼脂，pH为5.8‑6.0；2)启动培养一段时间以后，休眠的腋芽萌发，抽出新的幼嫩枝条，将得到的幼嫩枝条切下，接种到增殖培养基上，增殖培养10天以后，不定芽开始大量分化，15天以后，侧芽开始萌动，40‑50天以后，得到了大量的不定芽和侧芽枝条，不定芽分化为再生小苗；所述增殖培养基的培养条件为：温度25±2℃，光照时间为12h/d，光照强度为2000‑2500Lx，湿度为60％‑65％，增殖培养基为：wpm+0.01‑0.05mg/L玉米素ZT+0.5‑1mg/L激动素KT+0.005‑0.01mg/L萘乙酸NAA+3％蔗糖+0.6％琼脂，pH为5.8‑6.0；3)小苗培养30天以后，高度为5‑8cm，切掉小苗基部的愈伤组织，接种到生根培养基上进行培养，生根培养基为：1/2wpm+0.5‑1mg/L吲哚丁酸IBA+0.5‑1mg/L萘乙酸NAA+0.1‑0.5g/L活性炭+2％蔗糖+0.6％琼脂，pH为5.8‑6.0，所述的1/2wpm是指在wpm培养基的基础上，大量元素减半，其他元素不变；4)小苗生根培养一段时间后将生根的组培瓶苗转移到炼苗坑道中的苗床上，自然环境下炼苗15‑20天；5)移栽前清洗生根苗根部的培养基，并将其插入炼苗基质进行生长。