[发明专利]一种自制酶液生产壳寡糖的方法

摘要

本发明涉及一种酶法生产壳寡糖的技术领域；特别是提供一种自制酶液生产壳寡糖的方法的低成本方法。所述的方法包括酶液发酵培养一种高产脱乙酰酶的真菌构巢曲霉，得到用于甲壳素脱乙酰制备壳聚糖的酶液A；液体发酵培养一种高产含纤维素酶、淀粉酶的酶液B。用于壳聚糖酶解制备壳寡糖；采用两步酶解工艺，甲壳素先通过与酶液A反应得到壳聚糖，再通过与酶液B反应得到壳寡糖。本发明方法优势在于通过自产的酶液满足脱乙酰和酶解壳聚糖的需要，避免外购商品酶因干燥、保存、运输环节太多而造成的酶失活风险；提供一种非专一性的廉价酶源，降低生产成本，从而提高企业的自主能力，保证壳寡糖产业的稳定发展。

主权项

一种自制酶液生产壳寡糖的方法，其特征在于液体培养一种高产甲壳素脱乙酰酶的真菌构巢曲霉，过滤发酵液，得到一种含甲壳素脱乙酰酶的酶液A，酶活性＞300U/ml；液体培养一种高产纤维素酶、淀粉酶的解淀粉芽孢杆菌，过滤发酵液，得到一种含纤维素酶、淀粉酶的酶液B，酶液B的纤维素酶活性＞200U/ml，淀粉酶活性＞2300U/ml；把甲壳素细粉与酶液A反应，得到壳聚糖，壳聚糖配成5％水溶液，调节pH5.5，加入酶液B，保温45℃，反应8h，得到壳寡糖溶液。以超滤膜和RO反渗透膜分离纯化，截留分子量500‑3000的组分。真空浓缩，冷冻干燥，得到高纯度的壳寡糖粉末。