[发明专利]坐骨神经结扎皮下荷瘤大鼠模型及其在用于筛选镇痛抗肿瘤药物中的应用

摘要

本发明涉及了一种坐骨神经结扎皮下荷瘤大鼠模型及其在用于筛选镇痛抗肿瘤药物中的应用。本发明取皮下植入Walker256肿瘤细胞悬液的成年Wistar大鼠进行单侧坐骨神经结扎，以自发痛、机械痛阈值、热痛阈值反映大鼠疼痛程度，以大鼠体重改变、成瘤率、瘤体体积指示肿瘤生长情况。将待测药物以所需的方式和剂量施加于本动物模型后，通过观察上述指标的改变，判断待测药物在镇痛抗肿瘤方面的效果。本发明提供了一种既具有持续稳定的疼痛特征又能直观地测定大鼠肿瘤生长情况的实验性动物模型，用于探索疼痛促进肿瘤生长的机制及筛选新型镇痛抗肿瘤药物。为研发新型镇痛抗肿瘤药物提供了新载体。

主权项

坐骨神经结扎皮下荷瘤大鼠模型，其特征在于它通过以下制备方法制得：（1）、制备肿瘤细胞：将Walker256肿瘤细胞与生理盐水混匀形成细胞悬液；取雌性健康Wistar大鼠，每只大鼠腹腔内注射所述Walker 256 肿瘤细胞悬液，将大鼠饲养至大鼠的腹部出现明显的膨隆，抽出大鼠的腹水，离心弃去上清后，加入适量生理盐水，制备成浓度为1×10⁸ 个 / ml的体内活化的新鲜 Walker 256肿瘤细胞悬液，2～3 小时内使用；（2）、肿瘤细胞皮下植入：选取雌性健康Wistar大鼠，对其左侧腋窝处彻底消毒，吸取所述新鲜Walker256肿瘤细胞悬液接种于大鼠左侧腋窝皮下，以形成明显皮丘为宜；（3）、坐骨神经结扎：将大鼠称重后，经麻醉后取俯卧位，剃除毛发，用碘酊和消毒酒精消毒，在坐骨神经三叉分支的近端5 mm处，用手术缝合线做三道结扎，每道结扎之间间距1 mm，以不影响神经外膜的血运为度，逐层关闭刀口，缝合皮肤前后分别消毒；大鼠恢复3‑5天，注意观察避免伤口发炎。