[发明专利]一种利用烟曲霉菌生产烟曲霉素的方法有效
申请号: | 201510667060.3 | 申请日: | 2015-10-15 |
公开(公告)号: | CN106591389B | 公开(公告)日: | 2019-10-11 |
发明(设计)人: | 尹文兵;李伟 | 申请(专利权)人: | 中国科学院微生物研究所 |
主分类号: | C12P17/18 | 分类号: | C12P17/18;C12P17/04;A61K31/336;A61K31/343;A61P35/00;A61P33/02;A61P19/02;A61P29/00;A61P3/04;C12R1/68 |
代理公司: | 北京律和信知识产权代理事务所(普通合伙) 11446 | 代理人: | 武玉琴;刘国伟 |
地址: | 100101 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明涉及一种利用烟曲霉菌生产烟曲霉素(fumagillin)的方法,包括如下步骤:将所述烟曲霉菌接种于GMM固体培养基进行菌种活化,所述GMM培养基pH值为5‑7;将活化后的菌种孢子制备孢子悬液后接种于CYA固体培养基、CXMA固体培养基或LMM液体培养基,所述CYA固体培养基、所述CXMA固体培养基pH值自然,所述LMM液体培养基pH值调节为5‑7,在25℃至37℃条件下培养;收集培养的烟曲霉菌提取烟曲霉素及烟曲霉素衍生物。本发明针对影响烟曲霉生长及烟曲霉素的碳氮源以及微量元素进行了筛选,并对相应的微量元素浓度进行优化,获得了较高的烟曲霉素产量。 | ||
搜索关键词: | 烟曲霉素 固体培养基 曲霉菌 液体培养基 微量元素 接种 制备孢子悬液 菌种活化 菌种孢子 培养基pH 碳氮源 烟曲霉 活化 筛选 生产 生长 优化 | ||
【主权项】:
1.一种利用烟曲霉菌生产烟曲霉素的方法,其特征在于,包括如下步骤:将所述烟曲霉菌接种于GMM固体培养基进行菌种活化,调节所述GMM培养基pH值为5‑7;将活化后的菌种孢子制备孢子悬液后接种于CYA固体培养基、CXMA固体培养基或LMM液体培养基,所述CYA固体培养基、所述CXMA固体培养基pH值自然,所述LMM液体培养基pH值调节为5‑7,在25℃至37℃条件下培养;收集培养的烟曲霉菌及其培养基提取烟曲霉素及烟曲霉素衍生物;所述GMM固体培养基每升包括:葡萄糖10g,硝酸盐母液50mL,微量元素母液1mL,酵母抽提物1g,琼脂15‑20g,余量为蒸馏水,所述CYA固体培养基每升包括:NaNO3 2‑5g,K2HPO4·3H2O 0.5‑2g,MgSO4·7H2O 0.3‑1g,KCl 0.3‑1g,FeSO4·7H2O 0.01‑0.03g,蔗糖20.0‑40.0g,酵母抽提物3‑8g,琼脂15‑20g,余量为蒸馏水,所述CXMA固体培养基每升包括:MgSO4·7H2O 0.3‑0.5g,KCl 0.3‑0.8g,FeSO4·7H2O 0.01‑0.02g,木聚糖20‑40g,甘露糖30‑80g,谷氨酸5‑12g,琼脂15‑20g,余量为蒸馏水,所述LMM液体培养基为每升包括:葡萄糖10g,酵母抽提物10g,微量元素母液1mL,硝酸盐母液50mL,余量为蒸馏水,所述硝酸盐母液每升包括:NaNO3 120g,KCl 10.4g,MgSO4·7H2O 10.4g,K2HPO4·3H2O 30.4g,余量为蒸馏水,所述微量元素母液每100mL包括ZnSO4·7H2O 2.2g,H3BO3 1.1g,MnCl2·4H2O 0.5g,FeSO4·7H2O 0.16g,CoCl2·5H2O 0.16g,CuSO4·5H2O 0.16g,(NH4)6Mo7O24·4H2O 0.11g,Na2EDTA 5.0g,余量为蒸馏水。
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