[发明专利]基于不对称AS2-PCR的基因变异检测方法及引物在审
| 申请号： | 201510654829.8 | 申请日： | 2015-10-12 |
| 公开（公告）号： | CN106566871A | 公开（公告）日： | 2017-04-19 |
| 发明（设计）人： | 黄新华;戴慧清;李冰 | 申请（专利权）人： | 上海基致生物医药科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12N15/11 |
| 代理公司： | 上海浦一知识产权代理有限公司31211 | 代理人： | 丁纪铁 |
| 地址： | 200000 上海市康*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种基于不对称AS2‑PCR的基因变异检测方法，步骤包括1)提取样本DNA；2)扩增待测基因片段；3)将扩增产物加到不对称AS2‑PCR反应体系中，进行PCR扩增反应和探针外切反应；所述AS2‑PCR反应体系含有2条带荧光标记的通用标签信号探针、2条正向引物、1条反向引物、有外切活性的聚合酶和PCR缓冲液；4)检测反应的荧光信号，计算两个通道的Ct差值，并根据Ct差值判断待测基因SNP。本发明还公开了用于上述方法的不对称AS2‑PCR寡核苷酸引物组及其用途。本发明通过设计不对称AS2‑PCR的引物，克服了传统AS2‑PCR假阳性率高的问题，提高了基因变异检测的准确性。 | ||
| 搜索关键词： | 基于 不对称 as2 pcr 基因 变异 检测 方法 引物 | ||
【主权项】：
基于不对称AS2‑PCR的基因变异检测方法，其特征在于，包括以下步骤：1)提取样本DNA；2)以所述DNA为模板，扩增待测基因片段；3)将步骤2)的产物加入到不对称AS2‑PCR反应体系中，进行AS2‑PCR扩增反应和探针外切反应；所述AS2‑PCR反应体系含有2条带荧光标记的通用标签信号探针、2条AS2‑PCR正向引物、1条AS2‑PCR反向引物、有外切活性的聚合酶和PCR缓冲液；所述AS2‑PCR反向引物的量多于所述AS2‑PCR正向引物的量；4)检测步骤3)的反应产生的荧光信号，计算两个通道的Ct值和Ct差值，根据Ct差值判断待测基因的SNP。
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