[发明专利]一种地塞米松半抗原制备方法及其应用

摘要

本发明公开了一种地塞米松半抗原和相应的人工抗原，同时本发明也公开了所述地塞米松半抗原和相应的人工抗原的制备方法及其应用。本发明提供的地塞米松半抗原是式1所示产物，用式1所示产物与载体蛋白连接可以得到地塞米松抗原。所述地塞米松抗原可应用于制备地塞米松特异性抗体。本发明制备方法简便可行、成本较低，半抗原产率较高。本发明的地塞米松人工抗原，通过免疫动物可产生了针对地塞米松的特异性抗体，可用于制备检测地塞米松残留的酶联免疫检测试剂盒，具有简单、快速、处理样品量大、灵敏度高、特异性强等诸多优点。

主权项

1.一种地塞米松抗原，是由地塞米松半抗原和载体蛋白偶联得到的，其特征在于：（1）所述地塞米松半抗原为式1所示产物：     式1；（2）所述地塞米松半抗原是由如下方法制成：50ml圆底烧瓶中加入地塞米松原料药500mg，5ml吡啶溶解后加入琥珀酸酐110mg，80℃反应3h，TLC检测原料反应完毕后处理，减压蒸除吡啶，残余物中加入10ml冰水，析出白色固体，过滤，水洗干燥得350mg产品，即是半抗原；（3）所述地塞米松抗原的制备方法，包括如下步骤：1)、将半抗原22mg溶解于1.5mL DMF中，完全溶解后，依次加入EDC 25mg，NHS 25mg，室温磁力搅拌反应3h；2)、称取50mgBSA，溶解于3.5mL 0.1M碳酸缓冲液pH=9.6中，400rpm搅拌10min，充分溶解；3)、取上述步骤1中活化溶液，在冰水浴环境下逐滴加入到蛋白溶液中，边加边搅拌，室温磁力搅拌反应24h；4)、将反应产物装入1个蒸馏水冲洗干净15cm透析袋，1LPBS透析3天，室温搅拌透析，每天更换透析液3次，透析产物4500rpm离心6min，0.5ml/管分装，将抗原编号，‑20℃保存备用。