[发明专利]一种白首乌组培快繁方法

摘要

本发明公开了一种白首乌组培快繁方法，白首乌为萝摩科鹅绒藤属植物，其块根入药，味甘、苦、性微温。白首乌主要有效成分为C₂₁甾苷，具补血、补气、抗衰老、降血脂、降胆固醇以及促进乌发生长的作用，且无毒。本发明以白首乌种子为外植体，通过外植体消毒、不定芽诱导、增殖培养、生根培养、炼苗移栽等过程获得了白首乌离体再植株，建立了有效的白首乌组培快繁殖技术体系，短时期内即可生产大量种苗，提高繁殖效率，降低生产成本，有利加快其繁育及推广。

主权项

一种白首乌组培快繁方法，其特征在于包括以下步骤：（1）外植体准备及消毒：选取成熟饱满的白首乌种子，放入清水中浸种24～48h，在超净工作台上先75%的乙醇消毒30～60s，再用0.1%的升汞消毒 10～20min，然后用无菌水冲洗3～5次，用无菌滤纸吸干水分，接种到1/2MS培养基中0.4%琼脂、3.0%白糖，pH5.8，后置于每天光照12～14小时，光照强度为1000～2000lx培养14～30天；（2）诱导培养：将步骤（1）处理得到的无菌苗的带腋芽茎段切成约 0.5cm，顶端向上接入诱导培养基上，保持节位腋芽点在培养基表面上，接种后置于每天光照12～14小时，光照强度为1000～2000lx，置于培养温度为25～28℃，空气相对湿度为75%的条件下培养30天后统计诱导率；（3）增殖培养：以步骤（2）诱导得到不定芽作为材料，将老化的和生长不良的不定芽去掉，并将生长状态良好的不定芽切成单芽并转入增殖培养基进行扩繁，接种后置于每天光照12～14小时，光照强度为2000～3000lx，置于培养温度为25～28℃，空气相对湿度为75%的条件下培养30天后统计增殖情况；（4）生根培养：将增殖培养基中长到3cm以上的芽苗转入生根培养基中,接种后置于每天光照12～14小时，光照强度为2000～3000lx，置于培养温度为25～28℃，空气相对湿度为75%的条件下培养30天后统计生根情况；（5）炼苗移栽：当组培苗具备发达健壮的根后,即可移栽，移栽在遮阴棚中进行，将生长健壮的试管苗在自然条件下炼苗5～7天,再开盖炼苗3～5天.在试管苗移栽前,基质先用0.5%的KMnSO₄溶液消毒,后装入营养袋，用小勺轻轻取出带根小苗(带少许培养基)移到营养小钵中，移栽完用自动喷水装置将移栽苗浇透，以后每2h喷一次,每次喷50s。