[发明专利]兰索拉唑中兰索氯化物的测定方法

摘要

本发明所述的兰索拉唑中兰索氯化物的测定方法，采用高效液相色谱法中的杂质对照品外标法，色谱柱为反相强极性柱，流动相为乙腈‑pH6.2～6.5磷酸盐缓冲液，稀释剂为乙腈‑pH10.5磷酸盐缓冲液，检测波长为210nm。本发明的方法为目前主流的高效液相色谱法(HCLP)，灵敏度极高，实验显示检测限为0.5ppm，完全达到《基因毒性杂质限度指南》中对兰索拉唑中基因毒性物质8ppm的控制要求，专属性好，准确度高。根据ICH指导原则《Q2b方法学》进行方法学验证，结果均符合指导原则要求。

主权项

兰索拉唑中兰索氯化物的测定方法，采用高效液相色谱法中的杂质对照品外标法，色谱柱为反相强极性柱，流动相为乙腈‑pH6.2～6.5磷酸盐缓冲液，稀释剂为乙腈‑pH10.5磷酸盐缓冲液，检测波长为210nm；所述反相强极性柱选用氨基十六烷基硅胶色谱柱，色谱柱规格为：5μm，250×4.6mm；所述流动相体积比例为：乙腈:pH6.2～6.5磷酸盐缓冲液＝35:65；所述稀释剂体积比例为：乙腈:pH10.5磷酸盐缓冲液＝50:50；磷酸盐缓冲液的配制方法包括：无水磷酸氢二钠加入到水中溶解，用磷酸调PH值；测定时流速控制1.0ml/min，进样量为50μl，柱温为25℃‑35℃；具体测定的过程包括：1)、用稀释剂配制杂质对照品液：取对照品2‑氯甲基‑3‑甲基‑4‑(2,2,2‑三氟乙氧基)吡啶盐酸盐约20mg，精密称定，平行2份，置于250ml量瓶，加稀释剂适量使溶解，至刻度，摇匀，取2.0ml稀释到100ml，摇匀，再取1.0ml稀释至50ml，摇匀，过滤；2)、用稀释剂配制供试液：取兰索拉唑约100mg，精密称定，置于25ml量瓶，加稀释剂适量使溶解，稀释至刻度，摇匀，过滤；3)、用稀释剂配制分离度试验液：称取兰索拉唑约3mg、2‑氯甲基‑3‑甲基‑4‑(2,2,2‑三氟乙氧基)吡啶盐酸盐约3mg、兰索拉唑EP杂质A和兰索拉唑EP杂质B各约1mg，置于25ml量瓶，加稀释剂使溶解，并稀释至刻度；4)、测定：取稀释剂作空白液、分离度试验液各50μl，其中一份杂质对照品液平行5针各50μl，另一份杂质对照品液和供试液分别平行2针各50μl，分别注入高效液相色谱仪测定，记录色谱图；5)、按面积外标法计算兰索拉唑中兰索氯化物的含量X％：X％＝(Ax*C对/A对/Cx)*100％其中：Ax表示供试品中兰索氯化物的峰面积；Cx表示供试品溶液的浓度，μg/ml；C对表示对照品溶液的浓度，μg/ml；A对表示兰索氯化物对照品的峰面积。