[发明专利]一种核酸单链环状文库的构建方法和试剂有效

专利信息
申请号: 201480081853.0 申请日: 2014-11-26
公开(公告)号: CN108138364B 公开(公告)日: 2021-07-02
发明(设计)人: 耿春雨;陈若莹;江媛;赵霞;郭荣荣;贺玲瑜;李雅乔;章文蔚;蒋慧;拉多杰·德马纳克 申请(专利权)人: 深圳华大智造科技股份有限公司
主分类号: C40B50/06 分类号: C40B50/06;C12Q1/6806;C12Q1/6855;C12Q1/6853
代理公司: 北京清亦华知识产权代理事务所(普通合伙) 11201 代理人: 赵天月
地址: 518083 广东省深圳*** 国省代码: 广东;44
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摘要: 发明公开了一种核酸单链环状文库的构建方法和试剂,该方法包括如下步骤:使用转座酶包埋复合体对核酸进行随机打断,形成两端连接第一接头并形成缺口的片段;在缺口处连接第二接头;进行第一PCR反应,得到两端分别连接第一接头和第二接头序列的产物;酶切产生切口,然后进行双链环化产生环状核酸分子;从切口处进行限制性缺口平移反应;消化未发生限制性缺口平移反应的部分;连接第三接头和寡核苷酸接头序列;进行第二PCR反应,得到两端分别连接第三接头和寡核苷酸接头序列的产物;分离出核酸单链;对核酸单链进行环化,得到单链环状文库。本发明的方法通过转座酶打断与限制性缺口平移反应结合,实现简单、快速的核酸单链环状文库的构建。
搜索关键词: 一种 核酸 链环 文库 构建 方法 试剂
【主权项】:
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