[发明专利]一种核酸单链环状文库的构建方法和试剂有效
申请号: | 201480081853.0 | 申请日: | 2014-11-26 |
公开(公告)号: | CN108138364B | 公开(公告)日: | 2021-07-02 |
发明(设计)人: | 耿春雨;陈若莹;江媛;赵霞;郭荣荣;贺玲瑜;李雅乔;章文蔚;蒋慧;拉多杰·德马纳克 | 申请(专利权)人: | 深圳华大智造科技股份有限公司 |
主分类号: | C40B50/06 | 分类号: | C40B50/06;C12Q1/6806;C12Q1/6855;C12Q1/6853 |
代理公司: | 北京清亦华知识产权代理事务所(普通合伙) 11201 | 代理人: | 赵天月 |
地址: | 518083 广东省深圳*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明公开了一种核酸单链环状文库的构建方法和试剂,该方法包括如下步骤:使用转座酶包埋复合体对核酸进行随机打断,形成两端连接第一接头并形成缺口的片段;在缺口处连接第二接头;进行第一PCR反应,得到两端分别连接第一接头和第二接头序列的产物;酶切产生切口,然后进行双链环化产生环状核酸分子;从切口处进行限制性缺口平移反应;消化未发生限制性缺口平移反应的部分;连接第三接头和寡核苷酸接头序列;进行第二PCR反应,得到两端分别连接第三接头和寡核苷酸接头序列的产物;分离出核酸单链;对核酸单链进行环化,得到单链环状文库。本发明的方法通过转座酶打断与限制性缺口平移反应结合,实现简单、快速的核酸单链环状文库的构建。 | ||
搜索关键词: | 一种 核酸 链环 文库 构建 方法 试剂 | ||
【主权项】:
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