[发明专利]一种热纤梭菌的培养方法在审
申请号: | 201410827884.8 | 申请日: | 2014-12-25 |
公开(公告)号: | CN105779328A | 公开(公告)日: | 2016-07-20 |
发明(设计)人: | 李十中;齐泮仑;杜然;何皓;范桂芳;付兴国;胡徐腾;孙洪磊;李顶杰;雪晶;郑蕾;张家仁 | 申请(专利权)人: | 中国石油天然气股份有限公司 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12R1/01 |
代理公司: | 北京律诚同业知识产权代理有限公司 11006 | 代理人: | 王玉双;祁建国 |
地址: | 100007 北京市*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明公开了一种热纤梭菌的培养方法,包括以下步骤,步骤一:配制种子液培养基GS-2,将菌种ATCC27405接种于该种子液培养基;步骤二:配制发酵培养基并灭菌;步骤三:将培养好的种子液按一定比例接入到装有发酵培养基的厌氧瓶或发酵罐中;步骤四:温度60℃,厌氧,罐或瓶压为-0.1MPa~0.1MPa,控制氢气分压为0.01MPa,间歇性搅拌进行发酵。本发明的优点在于提供了一种快速获取热纤梭菌大量菌体浓度的发酵培养基和培养条件,并通过条件性诱导,获得了高密低的菌体浓度(常规培养的6-9倍)和显著提升的单位质量纤维素酶活力。 | ||
搜索关键词: | 一种 热纤梭菌 培养 方法 | ||
【主权项】:
一种热纤梭菌的培养方法,其特征在于,包括以下步骤:步骤一:配制种子液培养基GS‑2,所述种子液培养基包括:KH2PO41.5‑2.0g/L、K2HPO4(无水)2.9‑3.5g/L、氮源2.1‑2.5g/L、MgCl2·6H2O1.0‑1.5g/L、CaCl2·2H2O 150‑250mg/L、FeSO4·6H2O 1.25‑3mg/L、半胱氨酸盐酸盐1.0‑2g/L、刃天青钠盐2.0mg/L、碳源5.0‑15.0g/L、吗啉代丙烷磺酸10.0‑15.0g/L、酵母膏4.0‑6.0g/L和柠檬酸钠·2H2O 3.0‑5.0g/L,初始pH为7.0‑7.4;将菌种ATCC27405接种于该种子液培养基;步骤二:配制发酵培养基并灭菌,所述发酵培养基包括:KH2PO41.2‑1.5g/L、K2HPO4(无水)4.0‑6.0g/L、氮源5.0‑15.0g/L、MgCl2·6H2O2.0‑3.0g/L、CaCl2·2H2O 100‑250mg/L、FeSO4·6H2O 1.0‑3.0mg/L、半胱氨酸盐酸盐1.0‑3.0g/L、刃天青钠盐2.0mg/L、碳源15.0‑30.0g/L、吗啉代丙烷磺酸10.0‑15.0g/L、酵母膏10.0‑15.0g/L和柠檬酸钠·2H2O 0.5‑1.5g/L;步骤三:将培养好的种子液接入到装有发酵培养基的厌氧瓶或发酵罐中;步骤四:温度55~60℃,厌氧,罐或瓶压为‑0.1MPa~0.1MPa,控制氢气分压为0.01MPa,间歇性搅拌进行发酵。
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