[发明专利]一种RGD修饰的超小型超顺磁氧化铁纳米颗粒的制备方法

摘要

本发明涉及一种RGD修饰的超小型超顺磁氧化铁纳米颗粒的制备方法，包括：温和还原法制备PEI包覆的超小型超顺磁氧化铁纳米颗粒；USPIO/PEI.NH₂纳米颗粒表面修饰异硫氰酸荧光素(FI)和PEG化的RGD复合物(COOH-PEG-RGD)，以及纳米颗粒表面的乙酰化处理。本发明工艺简单，反应条件温和，易于操作；制备的超小型超顺磁氧化铁纳米颗粒粒径较小、弛豫率很高，并且具有良好的胶体稳定性、生物相容性和特定的α_vβ₃整合素高表达肿瘤细胞的靶向性，在体内肿瘤靶向MR成像诊断领域具有潜在的应用价值。

主权项

一种RGD修饰的超小型超顺磁氧化铁纳米颗粒的制备方法，包括：(1)将三价铁盐溶解于超纯水中，氮气鼓吹后加入亚硫酸钠溶液，反应30～40分钟；然后依次加入超支化聚乙烯亚胺PEI水溶液和NH₃·H₂O，60～70℃下恒温搅拌反应30～40分钟；然后在室温下反应1.5～3小时；反应结束后，将产物磁分离洗涤纯化，即得PEI包裹的超小型超顺磁氧化铁纳米颗粒USPIO/PEI.NH₂；(2)将步骤(1)中制备的USPIO/PEI.NH₂纳米颗粒用DMSO洗涤后，重新分散于DMSO中；再将DMSO溶解的FI加入到USPIO/PEI.NH₂的DMSO溶液中，搅拌反应1～2天，磁分离洗涤并分散于水中，得到USPIO/PEI.NH₂‑FI纳米颗粒；(3)将6‑(马来酰亚胺基)己酸琥珀酰亚胺酯6‑M与COOH‑PEG‑NH₂混合于DMSO溶液中，搅拌反应10～12小时，得到COOH‑PEG‑6‑M；然后再将充分溶解于DMSO中的端基为巯基的RGD SH‑RGD逐滴加入到COOH‑PEG‑6‑M的DMSO溶液中，搅拌反应1～2天，透析，真空冷冻干燥，即得到COOH‑PEG‑RGD；(4)将步骤(3)中制备的COOH‑PEG‑RGD与EDC、NHS混合溶解于DMSO后，搅拌活化2～4h；将步骤(2)中制备的USPIO/PEI.NH₂‑FI纳米颗粒用DMSO洗涤后，重新分散于DMSO中，然后加入活化的COOH‑PEG‑RGD溶液，搅拌反应2～4天，磁分离洗涤并分散于水中，得到USPIO/PEI.NH₂‑FI‑PEG‑RGD纳米颗粒；(5)向步骤(4)中制备的USPIO/PEI.NH₂‑FI‑PEG‑RGD纳米颗粒水溶液中加入三乙胺，并搅拌20～40分钟；然后加入乙酸酐，继续搅拌反应20～30小时，磁分离洗涤并分散于超纯水中，即得最终产物USPIO/PEI.NHAc‑FI‑PEG‑RGD。