[发明专利]一种续随子悬浮细胞的快速繁殖方法在审

专利信息
申请号: 201410540511.2 申请日: 2014-10-14
公开(公告)号: CN104255517A 公开(公告)日: 2015-01-07
发明(设计)人: 刘东锋;杨成东 申请(专利权)人: 南京帝道农业科技有限公司
主分类号: A01H4/00 分类号: A01H4/00
代理公司: 暂无信息 代理人: 暂无信息
地址: 211225 江苏*** 国省代码: 江苏;32
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摘要: 发明研究了一种续随子悬浮细胞的快速繁殖方法,包括续随子无菌叶片的获得、愈伤组织的诱导、悬浮细胞的培养、悬浮细胞的诱变等步骤,本发明方法所制备的续随子细胞活性高,生长周期短,细胞形状均一稳定,为药用植物细胞工业化生产奠定基础。
搜索关键词: 一种 续随子 悬浮 细胞 快速 繁殖 方法
【主权项】:
 一种续随子悬浮细胞的快速繁殖方法,包括续随子无菌叶片的获得、愈伤组织的诱导、悬浮细胞的培养、悬浮细胞的诱变等,其主要步骤如下:(1)取续随子幼嫩的叶片,进行消毒处理;(2)取步骤(1)消毒处理过的续随子幼嫩的叶片接入Miller+ZT0.5mg/L+KT1.5mg/L+0.4mg/ml青霉素培养基中进行愈伤组织诱导,附加蔗糖30g/L,琼脂6.5g/L,pH6.0,光照强度1000lx,光照时间6h/d,温度22℃;(3)取步骤(2)诱导出来的愈伤组织放入液体培养基Miller+0.3mg/LIAA+1.0‑1.5mg/L2ip+100mg/L水解乳蛋白进行液体悬浮细胞培养,附加蔗糖30g/L,pH5.8,光照2500lx,光照时间15h/d,温度24℃;(4)取步骤(3)培养一个月后的悬浮细胞放入过滤灭菌后的甲基磺酸乙酯溶液中,浓度为0.3%‑1%,处理时间为1‑5h,处理后加入新鲜的培养基中培养。
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