[发明专利]以低共熔物作为促溶剂利用静息细胞转化制备胆甾烯酮的方法有效
| 申请号： | 201410522163.6 | 申请日： | 2014-09-30 |
| 公开（公告）号： | CN104357526B | 公开（公告）日： | 2018-05-18 |
| 发明（设计）人： | 路福平;毛淑红;于璐;吉少娴;张会图;刘晓光 | 申请（专利权）人： | 天津科技大学 |
| 主分类号： | C12P33/02 | 分类号： | C12P33/02 |
| 代理公司： | 天津盛理知识产权代理有限公司 12209 | 代理人： | 赵瑶瑶 |
| 地址： | 300457 天津市滨*** | 国省代码： | 天津;12 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本发明涉及一种以低共熔物作为促溶剂利用静息细胞转化制备胆甾烯酮的方法，⑴静息细胞在发酵培养基中培养好以后，离心，加入无菌磷酸缓冲液重悬作为转化液；所述静息细胞具有将胆固醇氧化生成胆甾烯酮的能力；⑵在转化液中投入胆固醇，并添加低共熔物为促溶剂，乙酸乙酯萃取转化液，采用HPLC法检测产物胆甾‑4‑烯‑3‑酮的产率；⑶用柱层析分离法将底物胆固醇与产物胆甾烯酮进行分离，并纯化得到胆甾烯酮纯品。本发明采用低共熔物(DES)代替甲醇等有机溶剂作为绿色添加剂，添加低共熔物后，提高底物的分散率，有效促进底物胆固醇与菌体的接触，有效提高了静息细胞的转化效率，在加入和转化过程中操作条件温和，步骤简单。 | ||
| 搜索关键词： | 低共熔物 作为 溶剂 利用 细胞 转化 制备 胆甾烯酮 方法 | ||
【主权项】：
1.以低共熔物作为促溶剂利用静息细胞转化制备胆甾烯酮的方法，其特征在于：步骤如下：⑴静息细胞在发酵培养基中培养好以后，离心，加入无菌磷酸缓冲液重悬作为转化液；所述静息细胞具有将胆固醇氧化生成胆甾烯酮的能力；⑵在转化液中投入胆固醇，并添加低共熔物为促溶剂，乙酸乙酯萃取转化液，采用HPLC法检测产物胆甾-4-烯-3-酮的产率；⑶用柱层析分离法将底物胆固醇与产物胆甾烯酮进行分离，并纯化得到胆甾烯酮纯品；所述静息细胞为简单节杆菌(Arthrobactersimplex)；所述低共熔物为氯化胆碱/乙二醇混合摩尔比为1:2、1:1、2:1中的一种，或氯化胆碱/甘油混合摩尔比为1:2、1:1、2:1中的一种，或氯化胆碱/尿素混合摩尔比为1:2、1:1、2:1中的一种。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于天津科技大学，未经天津科技大学许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201410522163.6/，转载请声明来源钻瓜专利网。
- 上一篇：一种ON CELL固态全贴合模组加工方法
- 下一篇：一种实木线条的加工工艺
