[发明专利]一种快速即时分离人皮肤表皮细胞、黑色素细胞和成纤维细胞的装置及方法

摘要

本发明涉及医学细胞治疗领域，具体涉及一种快速、即时分离人皮肤中表皮细胞、黑色素细胞及成纤维细胞的装置，以及分离方法；本发明的分离装置由微型磁力加热搅拌器、操作面板、消化酶及等渗电解质溶液组成。本发明的分离方法不但明显减少了分离人体皮肤细胞所需仪器、简化了操作步骤，明显缩短了分离细胞所需时间，而且避免了血清的应用，显著减少过敏、病原微生物传播等严重并发症的发生，有利于人体皮肤细胞移植应用的广泛推广。本发明分离的细胞可用于瘢痕整形、各种原因所致色素异常改变(如白癜风、瘢痕性色素减退)的治疗及急慢性创面修复。

主权项

一种快速即时分离人皮肤表皮细胞、黑色素细胞和成纤维细胞的方法，其特征在于，该方法利用如下装置：磁力加热搅拌器和操作面板，所述的操作面板镶嵌于磁力加热搅拌器上，二者形成一个整体；所述的操作面板上设有3～5个孔，各孔分别为：一个消化孔；一到三个漂洗孔；一个磁力搅拌及过滤孔，所述的磁力搅拌及过滤孔内装有可抽取式80目～200目的过滤网，其内还放置一个磁力搅拌子，所述的磁力搅拌子的直径为0.1～1cm，长度为0.4～2cm；该方法包括以下步骤：A、将消化酶溶解于等渗电解质溶液中，配制成质量浓度为0.1％～1％的消化液，加入消化孔中，启动磁力加热搅拌器，预热5～10分钟，使溶液温度为25～40摄氏度；B、将需要分离的断层皮片，处理成厚度为0.15～0.6mm，大小为0.5cm2～16cm2；C、将切取步骤B的断层皮片置于消化孔中孵育5～45分钟；D、漂洗孔中加入等渗电解质溶液，将孵育后的断层皮片进行漂洗；E、将漂洗后的断层皮片平放于操作面板上，表皮面朝上，用手术用镊子揭起、分离表皮层，用一次性手术刀刮除表皮层的真皮面数次，并刮除真皮层的表皮面数次，得到少量的含细胞及部分杂质的溶液；然后用手术刀将表皮层适当切割成碎片，将所获得的含细胞及部分杂质的溶液及表皮碎片置于预先加入等渗电解质溶液的磁力搅拌及过滤孔中，常温下以100～1200rpm搅拌5～10分钟，然后取出可抽取式80目～200目的过滤网，在磁力搅拌及过滤孔中即可获得含分离细胞的溶液；所述的消化酶，为由胶原酶、中性蛋白酶及胰蛋白酶组成的固态消化酶，所述的胶原酶、中性蛋白酶及胰蛋白酶的重量比为1︰1︰1；所述的等渗电解质溶液，为pH值7.4的电解质溶液生理盐水、PBS液、D‑hank’s液，或Hank’S液。