[发明专利]同时检测迟缓爱德华氏菌和鮰爱德华氏菌的荧光探针PCR方法有效
申请号: | 201410441438.3 | 申请日: | 2014-09-01 |
公开(公告)号: | CN104164514A | 公开(公告)日: | 2014-11-26 |
发明(设计)人: | 郭书林;陈信忠;贾鹏;龚艳清;杨俊萍;陈炳颖;孔繁德 | 申请(专利权)人: | 厦门出入境检验检疫局检验检疫技术中心 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12Q1/04 |
代理公司: | 北京科亿知识产权代理事务所(普通合伙) 11350 | 代理人: | 汤东凤 |
地址: | 361009 福建*** | 国省代码: | 福建;35 |
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摘要: | 本发明涉及微生物的检测方法和检测试剂盒,具体涉及一种同时检测迟缓爱德华氏菌和鮰爱德华氏菌的荧光探针PCR检测方法,所述的方法包括:利用特异性探针和引物对,以细菌DNA为模板进行实时荧光PCR反应,其特征在于:所述引物对分别为SeqIDNo.1、SeqIDNo.2、SeqIDNo.3和SeqIDNo.4所示的序列;SeqIDNo.1:5’-CTGCCAAGCAGGGACGTAA-3’SeqIDNo.2:5’-CGAGGAGAGCATCTTGTCGAA-3’SeqIDNo.3:5’-TCCATTCGTCTGTGCGACAA-3’SeqIDNo.4:5’-AAAACACGTTCGGATGGATTG-3’所述探针为能与迟缓爱德华氏菌或鮰爱德华氏菌的基因组DNA位于所述引物对之间的序列相同或互补的核苷酸序列,并且所述探针的5’端和3’端分别标记有荧光报告基团和荧光淬灭基团;所述探针为SeqIDNo.5和SeqIDNo.6所示的序列,SeqIDNo.5:5’-ATCCTCAACGTCGAGAAGGCGCG-3’SeqIDNo.6:5’-CACTATGAGGGTGGGATCAAGGCGTTT-3’。 | ||
搜索关键词: | 同时 检测 迟缓 爱德华 荧光 探针 pcr 方法 | ||
【主权项】:
一种同时检测迟缓爱德华氏菌和鮰爱德华氏菌的荧光探针PCR检测方法,所述的方法包括:利用特异性探针和引物对,以细菌DNA为模板进行实时荧光PCR 反应,其特征在于:所述引物对分别为Seq ID No.1、Seq IDNo.2、Seq IDNo.3和Seq IDNo.4 所示的序列;Seq ID No.1: 5’‑CTGCCAAGCAGGGACGTAA‑3’Seq ID No.2: 5’‑CGAGGAGAGCATCTTGTCGAA‑3’Seq ID No.3: 5’‑TCCATTCGTCTGTGCGACAA‑3’Seq ID No.4: 5’‑AAAACACGTTCGGATGGATTG‑3’所述探针为能与迟缓爱德华氏菌或鮰爱德华氏菌的基因组DNA位于所述引物对之间的序列相同或互补的核苷酸序列,并且所述探针的5’端和3’端分别标记有荧光报告基团和荧光淬灭基团;所述探针为Seq ID No.5和Seq ID No.6所示的序列,Seq ID No.5:5’‑ATCCTCAACGTCGAGAAGGCGCG‑3’Seq ID No.6:5’‑CACTATGAGGGTGGGATCAAGGCGTTT‑3’。
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