[发明专利]奶牛致病菌五重PCR反应试剂盒

摘要

本发明涉及一种奶牛致病菌五重PCR反应试剂盒，包括检测产肠毒素大肠杆菌LT基因、产肠毒素性大肠杆菌ST基因、沙门氏菌invA基因、金黄色葡萄球菌nuc基因、单核细胞增生性李氏杆菌hlyA基因的五对引物。本发明以规模化牛场环境中常见的大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、单核增生性李氏杆菌为研究对象，利用这些致病菌不同的靶基因建立特异性强、可靠性和灵敏度高的多重PCR反应试剂盒，这不仅可以提高检测的灵敏度和准确性，且能够检测到一些传统方法很难检测到的致病菌，还为快速、高效检测和控制牛场环境中多种致病菌提供思路和方法。

主权项

一种奶牛致病菌五重PCR反应试剂盒，包括10×PCR反应缓冲液，Mg2+，dNTP，引物和Taq酶，其特征在于：所述的引物为：(1)检测产肠毒素性大肠杆菌LT基因的引物：F1：5′‑CTGACTCTAGACCCCCAGATGAAAT‑3′(SEQ ID No.1)R1：5′‑CTGTCCTGCTAAGTGAGCACTTCTC‑3′(SEQ ID No.2)(2)检测产肠毒素性大肠杆菌ST基因的引物：F2：5′‑AAAACCAGATAGCCAGACAATTAAC‑3′(SEQ ID No.3)R2：5′‑AGGATTACAACAAAGTTCACAGCAG‑3′(SEQ ID No.4)(3)检测沙门氏菌invA基因的引物：F3：5′‑GATTTGTCCTCCGCTCTGTCTACTT‑3′(SEQ ID No.5)R3：5′‑CAATACGATGCTGTTATCGTCCAGG‑3′(SEQ ID No.6)(4)检测金黄色葡萄球菌nuc基因的引物：F4：5′‑TAGGGATGGCTATCAGTAATGTTTC‑3′(SEQ ID No.7)R4：5′‑CCATCAGCATAAATATACGCTAAGC‑3′(SEQ ID No.8)(5)检测单核细胞增生性李氏杆菌hlyA基因的引物：F5：5′‑TATGATGACGAAATGGCTTACAGTG‑3′(SEQ ID No.9)R5：5′‑GAACAATTTCGTTACCTTCAGGATC‑3′(SEQ ID No.10)。