[发明专利]脱除掌叶半夏病毒的方法

摘要

本发明属于作物脱除病毒的方法，特别是指一种脱除掌叶半夏病毒的方法。采用低温处理、高温处理、消毒处理、切取珠芽培养、丛芽培养或诱导、生根培养；二次脱毒；经病毒检测、获得脱毒原种苗；经组培扩繁、炼苗移栽等方法获得掌叶半夏脱毒种苗。本发明解决了掌叶半夏脱除病毒技术问题，为生产提供脱毒掌叶半夏种苗，具有原理运用得当，方法易行，可有效为掌叶半夏的人工大面积种植，提高掌叶半夏的产量和进一步保障其质量等优点。

主权项

脱除掌叶半夏病毒的方法，其特征在于包括如下工艺步骤：a、低温处理在自然条件下越冬的掌叶半夏根部覆土3‑5厘米，当根部地温在－2℃—3℃时，挖开根部土壤，取掌叶半夏刚刚萌动的芽尖；b、高温处理将取下的芽尖涮洗干净，置于铺有湿润滤纸的培养皿中，置到培养箱中进行在温度为50℃，高温处理15分钟；c、消毒处理将高温处理过的芽尖用肥皂水涮洗干净，在超净工作台上进行灭菌处理；d、切取珠芽培养：将消毒好的芽尖，在超净工作台上，双目实体解剖镜下，解剖针剥取0.3‑0.5mm大小的芽尖生长点，接种于诱导培养基进行培养,获得丛生芽或愈伤组织；e、丛芽培养或诱导e1、获得的丛生芽可直接转接到第一分化培养基上进行分化培养；e2、获得的愈伤组织经进一步调控培养，成疏松愈伤组织后，转接到第二分化培养基上诱导培养丛生芽；f、生根培养将步骤e中获得的丛生芽经多代分化转接，形成无根组培苗，然后转接到生根培养基上进行生根培养，生成可移栽的瓶苗；g、二次脱毒将步骤f中制成的生根瓶苗置于光照培养箱中在38℃高温处理30天，再切取茎尖生长点，培养成植株；h、植株病毒检测用酶链免疫吸附法检测步骤g中获得的植株，获得脱除了烟草花叶病毒的掌叶半夏原种苗；i、炼苗移栽利用组培快繁技术，对步骤h中获得的脱毒掌叶半夏原种苗进行快速繁育,获得掌叶半夏脱病毒种苗。