[发明专利]一种空心李组培快繁脱毒的方法

摘要

本发明公开了一种空心李组培快繁脱毒的方法，包括如下步骤：1)植体的选取与预处理，2)茎尖的剥离，3)茎尖的诱导培养，4)增殖培养，5)生根培养，6)脱毒苗的培养，7)病毒病菌检测。本发明将茎尖脱毒、高温处理脱毒法和化学试剂脱毒法三种方式相结合，对沙子空心李育苗的组织培养、快速繁育具有良好的去病毒作用，获得的脱毒苗经病毒检测，所有育苗均脱毒成功，无李矮缩病毒(PDV)、李坏死环斑病毒(PNRSV)感染。利用该方法对空心李进脱毒处理，通过组培培育出新的无病毒的空心李树苗，再经过驯化和移栽，从而达到增加产量，改善水果口感的目的。

主权项

一种空心李组培快繁脱毒的方法，包括如下步骤：1)植体的选取与预处理：将沙子空心李植株上的健壮枝条剪下，用生根剂处理后，扦插在经过处理的人工基质上，待成活长出新芽后转入培养室内，每日于35‑40℃、2000‑3000Lux光照条件下培养14‑18小时，然后在常温、黑暗条件下培养6‑10小时，共培养28‑35天；2)茎尖的剥离：取经步骤1)预处理后的空心李粗壮的茎芽，剥去叶片，冲洗干净后进行常规消毒，然后将茎芽置于40倍解剖镜下，用无毒解剖针将叶片和叶原基剥掉，分离出茎芽顶端的分生组织，然后将其快速接种至诱导培养基中；3)茎尖的诱导培养：将在诱导培养基中接种好的茎尖置于22‑28℃、1500‑2000Lux的光照条件下每天培养14‑18小时，直至长成小苗；4)增殖培养：待小苗长至1‑1.5cm高时，切下茎尖部分，转移到增殖培养基上继续培养，培养条件为：每日32‑38℃、1500‑2000Lux光照12‑16小时，常温培养8‑12小时；苗高2cm时，剪取小苗叶片进行病毒检测，通过检测后确认无病毒的小苗，切段转移到增殖培养基上继续培养至10‑20倍数量；5)生根培养：将步骤4)增殖形成的小苗分成单株，转移到生根培养基上，在常温下进行生根培养，长成生根组培苗；6)脱毒苗的培养：将已生根的小苗从瓶内取出，洗净根部的培养基，晾干，然后在中抗病毒药剂中浸泡一下，用灭菌处理过的苔藓包根，栽在鱼苗钵或育苗盘内，置于具有防虫网的温棚内进行培养，待小苗生长成正常植株后，剪取枝条扦插，育成生产用的脱毒苗；7)病毒病菌检测：采用草本植物指示检测法或电镜检测法对步骤5)的脱毒苗进行检测。