[发明专利]大薯脱毒组培苗的培养方法

摘要

本发明公开了一种大薯脱毒组培苗的培养方法，包括如下步骤：(1)植物外植体的选择及无菌处理；(2)丛生芽诱导培养；(3)增殖培养；(4)壮苗培养；(5)生根培养。所述培养所用培养基均为特定的培养基。本发明的大薯脱毒组培苗的培养方法，优点在于：无菌条件下茎尖剥离，选用配方合理的培养基，在特定的培养条件下，培养出的大薯组培苗可脱除病毒，生根率高，移栽成活率高，可有效恢复优良品种的特性。通过本发明方法生产大薯脱毒种苗，产量大，成本低，周期短，可快速有效地繁殖大薯脱毒组培苗。

主权项

一种大薯脱毒组培苗的培养方法，其特征在于：包括如下步骤：(1)植物外植体的选择及无菌处理：选择大薯带芽茎段为外植体，用水冲洗干净，切取顶芽，顶芽用75％酒精消毒30～60秒，再用浓度为5％～10％次氯酸钠溶液消毒6～10分钟，消毒后，取出顶芽，无菌水冲洗3～5次，最后用无菌滤纸吸干无菌水，无菌条件下剥取茎尖；(2)丛生芽诱导培养：将上述剥取的茎尖接种到丛生芽诱导培养基中诱导丛生芽，培养期为40天，得丛生芽；所述丛生芽诱导培养基的组份组成为：MS+BA 1.5～2.0mg/L+GA₃0.1～0.5mg/L+NAA 0.1～0.5mg/L+蔗糖20～30g/L+琼脂4～6g/L；(3)增殖培养：将上述诱导出的丛生芽接种到增殖培养基中进行继代培养，30天继代一次，连续转接4次，培养期为120天；所述增殖培养基的组份组成为：MS+BA 2.0～3.0mg/L+NAA 0.2～0.5mg/L+蔗糖20～30g/L+琼脂4～6g/L；(4)壮苗培养：将上述增殖培养出的丛生芽切成单芽或者小丛芽，接种到壮苗培养基中，培养期为20天；所述壮苗培养基的组份组成为：MS+BA 0.5～1.0mg/L+IBA 0.1～0.6mg/L+蔗糖20～30g/L+琼脂4～6g/L；(5)生根培养：将上述壮苗培养后的开叶的小苗接种到生根培养基中，培养期为35天，即得大薯脱毒组培苗；所述生根培养基的组份组成为：1/2MS+IBA 0.1～0.5mg/L+蔗糖20～30g/L+琼脂4～6g/L。