[发明专利]一种用于定量杀菌研究的大肠杆菌培养方法

摘要

本发明公开一种用于定量杀菌研究的大肠杆菌培养方法，首先，菌液和无菌水配置成原始菌液；然后，用笔在混合纤维素酯滤膜上画出1×1cm的正方形方格，取无菌水清洗滤膜，接上真空泵开始抽滤直至水分消失，在确定压力为零后加入10ml上述原始菌液，抽滤至滤膜表面完全干燥，整个过程不超过20s；其次，在超净工作台中将滤膜沿着方格用剪刀剪成一个1×1cm的菌膜块；最后，用无菌镊子或无菌的针将菌膜块分装到无菌、干燥后的培养皿中待用。这种方法确定了所需灭菌的面积，细菌在滤膜表面形成的菌膜相当均匀，每个样品之间的差别不是很大，在制作杀菌样品时的时间很短，大大降低了细菌在制备处理样品中死亡的可能性，以及制样前后的细菌含量差异非常小。

主权项

一种用于定量杀菌研究的大肠杆菌培养方法，其特征在于该方法的步骤如下：(1)、取4ml扩大培养后的菌液加入到36ml的无菌水至50ml无菌离心管中，配置成原始菌液备用；用笔在47mm直径的0.22μm孔径的混合纤维素酯滤膜上画出1×1cm的正方形方格，然后将有笔迹的一面朝下覆盖于过滤器上，夹上夹子，用移液器移取5ml无菌水清洗滤膜，接上真空泵开始抽滤直至水分消失；(2)、在确定压力为零后加入10ml上述原始菌液，抽滤至滤膜表面完全干燥，整个过程不超过20s；(3)、在超净工作台中将滤膜沿着方格用剪刀剪成一个1×1cm的菌膜块；(4)、用无菌镊子或无菌的针将菌膜块分装到无菌、干燥后的培养皿中待用。