[发明专利]一种犬源单链抗体及其构建方法和应用有效
| 申请号： | 201410263525.4 | 申请日： | 2014-06-13 |
| 公开（公告）号： | CN104017080A | 公开（公告）日： | 2014-09-03 |
| 发明（设计）人： | 李守军;李华涛;贾坤;孙凌霜 | 申请（专利权）人： | 华南农业大学 |
| 主分类号： | C07K16/34 | 分类号： | C07K16/34;C12N15/11;C12N15/13;C12N15/70;C40B40/10;C40B50/06;G01N33/80 |
| 代理公司： | 广州粤高专利商标代理有限公司 44102 | 代理人： | 林丽明 |
| 地址： | 510642 广*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明涉及生物技术领域，具体公开了一种犬源单链抗体及其构建方法和应用。本发明通过设计犬抗体可变区简并引物，成功扩增出犬的重链可变区VH和轻链可变区VL基因。在此基础上利用噬菌体展示技术，成功构建犬源单链抗体scFv文库。所构建的scFv单链抗体库具有多样性和足够大的库容量。本发明通过Dot-ELISA方法用犬DEA1.1血型抗原从scFv单链抗体库中筛选到3株能够与犬DEA1.1血型抗原相结合的单链抗体。其中Clone16具有较强的结合特性。根据Clone16基因构建了pET-32a-Clone16重组蛋白进行原核表达，纯化得到的抗体具有结合活性。为制备犬DEA1.1血型鉴定试剂提供了坚实的基础。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 犬源单链 抗体 及其 构建 方法 应用 | ||
【主权项】：
一种犬源单链抗体Clone 16，其特征在于，所述抗体的scFv序列长870bp，序列如SEQ ID NO：48所示；其中重链可变区VH长435bp，序列如SEQ ID NO：49所示；轻链可变区VK长390bp，序列如SEQ ID NO：50所示；连接肽序列长45bp，序列如SEQ ID NO：51所示。
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