[发明专利]一种从大豆乳清废水中提纯Kunitz型胰蛋白酶抑制剂的方法

摘要

一种从大豆乳清废水中提纯Kunitz型胰蛋白酶抑制剂的方法，属于农产品加工及副产品综合利用技术领域。本发明包括大豆乳清废水的预处理、复凝聚、离心、除糖、二次离心和蛋白回收得到最终产品。原料预处理后经复凝聚得到终蛋白多糖复合物，终蛋白多糖复合物经离心除糖，二次离心后即得含有纯化Kunitz型胰蛋白酶抑制剂的蛋白溶液。该蛋白溶液经过真空冷冻干燥得到Kunitz型胰蛋白酶抑制剂纯品。本发明对大豆乳清蛋白废水综合利用，原料无需干燥，设备要求低，操作简单，无环境污染。且Kunitz型胰蛋白酶抑制剂回收率高，纯度高，蛋白活性高。

主权项

一种从大豆乳清废水中提纯Kunitz型胰蛋白酶抑制剂的方法，其特征在于步骤为：（1）大豆乳清废水的预处理：将大豆乳清废水用pH调节剂调节至pH4.5，离心，除沉淀；再次pH调节剂调节pH至7.0‑10.0，离心，除沉淀，收集上清液；将上述上清液经过截留分子量3500‑8000Da的透析膜透析，脱盐36‑48h，即得大豆乳清液；（2）大豆乳清液与聚阳离子多糖复凝聚：将步骤（1）制备的大豆乳清液用去离子水稀释1‑4倍，使其中大豆乳清蛋白的质量浓度为0.1%‑0.4%，得大豆蛋白乳清液；将上述大豆蛋白乳清液与质量浓度为0.1%‑0.4%的聚阳离子多糖溶液按照体积比为100‑200︰1混合，pH调节剂调节pH至4.0‑6.0，离心，收集沉淀；对上清液重复以上步骤2‑3次，合并沉淀物，即得Kunitz型胰蛋白酶抑制剂与聚阳离子多糖的复合物；（3）纯化Kunitz型胰蛋白酶抑制剂：将步骤（2）得到的Kunitz型胰蛋白酶抑制剂与聚阳离子多糖的复合物悬浮于2‑3倍体积的去离子水中，pH调节剂调节pH至8.0‑11.0，离心，弃去沉淀物，收集上清液，真空冷冻干燥，即得纯化的Kunitz型胰蛋白酶抑制剂。