[发明专利]前列腺组织分离和建立原代上皮细胞和/或间质细胞的方法在审
申请号: | 201410176073.6 | 申请日: | 2014-04-28 |
公开(公告)号: | CN104152398A | 公开(公告)日: | 2014-11-19 |
发明(设计)人: | 江明;李铁军;彭薇;张平静 | 申请(专利权)人: | 百奥迈科生物技术有限公司 |
主分类号: | C12N5/071 | 分类号: | C12N5/071;C12N5/077 |
代理公司: | 上海申汇专利代理有限公司 31001 | 代理人: | 翁若莹;王婧 |
地址: | 226016 江苏省*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明提供了一种前列腺组织分离和建立原代上皮细胞和/或间质细胞的方法,其特征在于,具体步骤包括:将小鼠前列腺叶组织剪碎,用原代细胞培养液洗涤,将剪碎的组织转移到离心管中离心;用原代细胞培养液重悬组织并转移到T-25培养瓶中培养,当组织块粘附在瓶底之后,倒出培养液并重新加入原代细胞培养液培养,小鼠前列腺上皮和间质细胞从组织块周围生长出;用胰酶充分消化生长出的细胞,离心收集细胞并将其转移至另一新的含原代培养基的培养瓶中,得到小鼠前列腺组织原代上皮细胞和间质细胞。本发明方法简便易行、重复性好、成本低。 | ||
搜索关键词: | 前列腺 组织 分离 建立 上皮细胞 间质 细胞 方法 | ||
【主权项】:
一种前列腺组织分离和建立原代上皮细胞和/或间质细胞的方法,其特征在于,具体步骤包括:第一步:将小鼠前列腺叶组织剪碎,用原代细胞培养液洗涤,将剪碎的组织转移到离心管中,并离心;第二步:用原代细胞培养液重悬组织并转移到T‑25培养瓶中,在37℃培养箱中培养1~2天,当组织块粘附在瓶底之后,倒出培养液并重新加入原代细胞培养液培养,2~3天后,小鼠前列腺上皮和间质细胞从组织块周围生长出:第三步:用胰酶充分消化生长出的细胞,离心收集细胞并将其转移至另一新的含原代培养基的培养瓶中,得到小鼠前列腺组织原代上皮细胞和间质细胞;或者,在倒置显微镜下辨别各种细胞和组织块的类型,用细胞刮刀将间质细胞和组织块刮掉或将上皮细胞和组织块刮掉,用原代培养基洗涤后,用胰酶充分消化生长出的细胞,离心收集细胞并将其转移至另一新的含原代培养基的培养瓶中,得到小鼠前列腺组织原代上皮细胞或间质细胞。
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