[发明专利]改进的六胺银马松套染法

摘要

本发明涉及一种改进的六胺银马松套染法，包括以下步骤：配制银染试剂；将组织切片用Bouin液固定；切片依次浸入2.5%碘酒、5%硫代硫酸钠、1.5%高碘酸；取银染A液和银染B液浸染切片，直至基底膜显示清晰的黑色后终止；3%硫代硫酸钠浸泡切片；苏木素浸染；盐酸酒精分化，水洗返蓝；丽春红染液浸染；1%磷钼酸浸泡切片；经梯度酒精脱水后入二甲苯透明，中性树胶封片。本发明提供了一种试剂调配合理、染色效果好且时间短、性能稳定、套染色泽鲜艳的六胺银马松套染法，并在实验中取得了比现有方法更好的效果，改变了银染色中组织容易出现过染，时间、温度较难控制，背景颜色过高及套染别的染色色彩不够鲜艳等问题。

主权项

一种改进的六胺银马松套染法，其特征在于，包括以下步骤：（1）配制银染试剂，包括：银染A液：蒸馏水230ml，5%硼砂45ml，4%硼酸4ml，15%六次甲基四胺60ml；银染B液：蒸馏水100ml，10g硝酸银；5%硼砂：蒸馏水100ml，5g硼砂；15%六次甲基四胺：蒸馏水100ml，15g六次甲基四胺；4%硼酸：蒸馏水100ml，4g硼酸；1.5%高碘酸：蒸馏水100ml，1.5g高碘酸；丽春红染液：丽春红S0.7g，酸性品红0.3g，蒸馏水100ml，冰醋酸1ml；1%苯胺蓝：苯胺蓝1g，冰醋酸1ml，蒸馏水100ml；1%磷钼酸：磷钼酸1g，蒸馏水100ml；（2）将组织切片用Bouin液固定，脱蜡，入水；（3）切片浸入2.5%碘酒3分钟，蒸馏水洗3次；（4）切片浸入5%硫代硫酸钠5分钟，蒸馏水洗3次；（5）切片浸入1.5%高碘酸15分钟，氧化温度在20‑25℃之间，蒸馏水洗3次；（6）取银染A液30ml过滤并于70℃预热25分钟；（7）将银染B液0.82ml加入预热好的银染A液中，混匀放入切片，70℃浸染15分钟后每5分钟镜下观察基底膜的着色情况，直至基底膜显示清晰的黑色后终止；蒸馏水洗3次；（8）3%硫代硫酸钠浸泡切片15秒，水洗3分钟×3次；（9）苏木素浸染15分钟，水洗；（10）盐酸酒精分化，水洗返蓝；（11）丽春红染液浸染12分钟，水洗1分钟×3次；（12）1%磷钼酸浸泡切片1分钟，直接入1%苯胺蓝浸染4分钟；（13）切片经梯度酒精脱水后入二甲苯透明，中性树胶封片。