[发明专利]一种鸡艾美耳球虫卵囊分离纯化的工业化生产方法无效
申请号: | 201410082352.6 | 申请日: | 2014-03-07 |
公开(公告)号: | CN103881913A | 公开(公告)日: | 2014-06-25 |
发明(设计)人: | 吴彩艳;孙铭飞;戚南山;廖申权;吕敏娜;李娟;谢明权;温列娜 | 申请(专利权)人: | 广东省农业科学院动物卫生研究所 |
主分类号: | C12N1/10 | 分类号: | C12N1/10;C12R1/90 |
代理公司: | 广州嘉权专利商标事务所有限公司 44205 | 代理人: | 郑莹 |
地址: | 510640 广东省广州市天*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明公开了一种鸡艾美耳球虫卵囊分离纯化的工业化生产方法。该方法通过采用碟片分离机和管式离心机的科学组合,对鸡艾美耳球虫卵囊进行分离纯化,孢子化卵囊纯化后,无较大杂质,且无极微小的杂质。玻片镜检极其干净,未孢子化卵囊也全部剔除干净,视野中均为孢子化卵囊,溶液背景清晰。本发明方法缩短了卵囊分离纯化时间,与传统技术相比,节省时间70%以上;整个卵囊纯化避免太多人为工作的干扰,减少了过多人为因素造成产品的不稳定,是目前球虫疫苗生产方法的突破;本方法只需两台离心机,便可连续生产,极大地降低企业的成本投入。 | ||
搜索关键词: | 一种 鸡艾美耳球 虫卵 分离 纯化 工业化 生产 方法 | ||
【主权项】:
一种鸡艾美耳球虫卵囊分离纯化的工业化生产方法,包括如下步骤:(1)粪样处理:收集鸡感染球虫后第120~192h的粪便,加水重悬粪便,浸泡1~3h后,通过自流方式,使粪便混合液利用自身压力差,压入碟片分离机,离心收集沉淀;(2)经过碟片离心机后的上清再次利用蠕动泵经过管式离心机,离心收集沉淀;(3)将两次离心的沉淀混合,向沉淀中加入2~4倍体积的饱和盐水,通过自流方式,使粪便混合液利用自身压力差,压入碟片分离机,离心收集上清;(4)上清中加入3~5倍饱和盐水体积的水,碟片离心机离心,收集沉淀,沉淀即为卵囊,用水洗涤后,沉淀用重铬酸钾溶液重悬,置25~30℃,待卵囊孢子化率达到80~90%后,收集卵囊,再通过碟片离心机弃重铬酸钾溶液;(5)以水重悬洗涤卵囊,然后以次氯酸钠溶液重悬卵囊,管式离心机离心,离心沉淀物即为纯化的孢子化卵囊,再次以水重悬洗涤,除去次氯酸钠溶液,然后以重铬酸钾溶液重悬孢子化卵囊低温保存备用。
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